一种两阶段发酵提高毕赤酵母产胆盐水解酶的方法

摘要

本发明公开了一种两阶段发酵提高毕赤酵母产胆盐水解酶的方法，属于发酵工程技术领域。本发明采用重组DNA技术将植物乳杆菌来源的胆盐水解酶基因bsh与信号肽α‑MF融合并与载体pPIC9K连接，并转化至毕赤酵母GS115中，获得产胆盐水解酶的重组毕赤酵母。并通过两阶段控制pH的发酵策略，发酵前期促进菌体生长，发酵后期促进酶活表达，使毕赤酵母发酵5d后，产胆盐水解酶的酶活提高至11.54U/mL，与分批发酵相比提高了62.1％。

主权项

一种两阶段发酵生产胆盐水解酶的方法，其特征在于，采用表达胆盐水解酶的重组毕赤酵母为出发菌株，两阶段控制策略发酵生产胆盐水解酶；所述两阶段控制策略是：菌体生长阶段控制温度为28～30℃，pH7.0～7.5，搅拌转速500～600rpm；产酶阶段将发酵温度降至25～28℃，pH 6.0～6.5，搅拌转速500～600rpm。