白蜡虫抗冻蛋白基因ep‑afp及其编码的氨基酸序列

摘要

本发明为白蜡虫抗冻蛋白基因ep‑afp及其编码的氨基酸序列，涉及分子生物学以及基因工程领域。本发明以我国东北地区耐极端低温的白蜡虫为材料，通过PCR扩增得到目的片段，连接到pGEM‑T载体上构建重组质粒，获得ep‑afp基因的阳性重组克隆；利用同源重组构建原核表达载体pET‑22b/afp，重组质粒转入BL21表达菌株中进行原核表达，利用差示扫描量热法分析纯化蛋白的热滞活性为0.91℃。根据烟草密码子修改后的白蜡虫抗冻蛋白基因序列作为提高植物抗寒性转化的重要候选基因。本发明的白蜡虫抗冻蛋白ep‑afp是具备抗冻作用的新的蛋白，具有很大的应用价值。

主权项

白蜡虫抗冻蛋白基因ep‑afp由SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列组成。