一种诊断日本血吸虫循环抗原的方法

摘要

本发明涉及生物医学和纳米材料学两方面内容，具体涉及金纳米棒传感器的制备以及对日本血吸虫(Schistosomiasis Japonica)(大陆株)循环抗原检测方法的构建。其发明采用固相载体‑ITO玻片与金纳米棒结合，再将日本血吸虫26‑28Kd单链抗体与其结合构建检测传感器，并对日本血吸虫循环抗原进行诊断，通过UV扫描传感器观察其消光峰的变化来确定日本血吸虫感染与否。

主权项

一种诊断日本血吸虫循环抗原的方法，其特征在于包括以下步骤：A..金纳米棒的制备：使用种子生长法，制备金纳米棒；B.ITO玻片的预处理：先将ITO玻片用双蒸水清洗干净，然后放入煮沸的食人鱼洗液中，配方体积比为：浓硫酸∶双氧水＝3∶1，待完全冷却后，取出，洗净，吹干；C.ITO玻片羟基化：将预处理好的ITO玻片放入已冷却的食人鱼洗液中，然后水浴加热至65‑75℃，40‑50分钟，待完全冷却后，取出，洗净，吹干；D.将已经羟基化的ITO玻片分别浸入到聚苯乙烯磺酸钠(PSS)和聚丙烯胺盐酸盐(PAH)溶液中，25‑30℃，30‑40分钟，取出，洗净，吹干；E.将D中已经修饰ITO玻片浸入到制备好的金纳米棒溶液中，25‑30℃浸泡15‑19小时，取出，洗净，吹干；F.将E中已结合金纳米棒的ITO玻片放入ScFv溶液中，即日本血吸虫26‑28KD单链抗体，放置4℃，7小时，取出，洗净，吹干；G.将F中已构建好的固相传感器分别浸入到血吸虫感染的阳性兔血清和阴性兔血清中，4℃，放置30分钟‑4小时，取出，洗净，吹干；H.将与血清反应的固相传感器置于紫外分光光度计检测其消光峰值；最后，通过观察其消光值的变化来检测是否有日本血吸虫循环抗原的存在。