用于酶固定化的改性磁性壳聚糖微球、其制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种用于酶固定化的改性磁性壳聚糖微球、其制备方法及应用，上述制备方法包括：在0.5g壳聚糖粉末和0.125g纳米四氧化三铁中加入质量分数为4%的乙酸溶液，充分溶解后，加入液体石蜡，250r/min转速下搅拌10分钟；升温至50℃，滴加乳化剂Span80，乳化10分钟；加入1.0mL的甲醛溶液，搅拌反应1.5小时；升温至70℃，滴加质量分数为10%的NaOH溶液，缓慢滴加2.0mL的环氧氯丙烷，反应5小时；过滤洗涤，得到磁性壳聚糖微球（MCTS）；将50mg MCTS加入50mL DMF浸泡；加入200mgTAP，在氮气保护条件下于100℃下搅拌反应12小时；用反应溶剂浸泡洗涤至洗涤液为无色，再依次用蒸馏水、无水乙醇洗涤后，干燥至恒重，得到用于酶固定化的改性磁性壳聚糖微球（MCTS-TAP）。本发明能够提供固定化酶的良好载体。

主权项

一种用于酶固定化的改性磁性壳聚糖微球的制备方法，其特征在于，包括：（1）在0.5g壳聚糖粉末和0.125g纳米四氧化三铁中加入质量分数为4%的乙酸溶液，待壳聚糖粉末充分溶解后，加入液体石蜡，250r/min转速下搅拌10分钟；（2）将步骤（1）的所得物升温至50℃，滴加乳化剂Span80，乳化10分钟；（3）在步骤（2）的所得物中加入1.0mL的甲醛溶液，搅拌反应1.5小时；（4）将步骤（3）的所得物升温至70℃，滴加质量分数为10%的NaOH溶液，在溶液pH值保持为碱性条件下，缓慢滴加2.0mL的环氧氯丙烷，反应5小时；（5）将步骤（4）的所得物过滤，用蒸馏水洗涤，再依次用石油醚、无水乙醇洗涤、水洗涤，直至洗涤液的pH值达到中性；（6）将50mg步骤（5）的所得物加入50mL反应溶剂N,N‑二甲基甲酰胺(DMF)中浸泡；（7）在步骤（6）的所得物中加入200mgTAP及催化剂，在氮气保护条件下于100℃下搅拌反应12小时；（8）将步骤（7）的所得物用反应溶剂浸泡洗涤至洗涤液为无色，再依次用蒸馏水、无水乙醇洗涤后，干燥至恒重，得到用于酶固定化的改性磁性壳聚糖微球（MCTS‑TAP）。