抗原特異的Ｂ細胞の同定及び単離ならびに所望の抗原に対する抗体作製のプロトコール

摘要

抗原特異的な抗体分泌細胞及び抗体産生細胞、たとえば抗原特異的Ｂ細胞の同定方法、ならびにこれらの細胞によって産生される抗原特異的抗体の抗体配列のクローニング方法が提供される。具体的には、当該方法は、抗原特異的Ｂ細胞を得るためにＢ細胞を濃縮すること、クローン性Ｂ細胞集団を作製するために抗原特異的Ｂ細胞を培養すること、単一の抗原特異的抗体を産生するクローン性Ｂ細胞を検出すること、任意で、クローン性Ｂ細胞集団を機能活性についてスクリーニングすること、抗原特異的Ｂ細胞を単離するために細胞を染色し分取すること、抗原特異的抗体配列をコードする核酸の配列を決定すること、抗体を作製するために配列を発現させること、抗体を単離すること、及び抗体を抗原認識についてスクリーニングすることを含む。当該方法は、抗原特異的な抗体分泌細胞及び抗体産生細胞の濃縮及び選択に改善をもたらし、抗原特異的抗体の回収を向上させる。【選択図】図１