一种烟草中除草剂残留的合相色谱分析方法

摘要

本发明涉及一种烟草中除草剂残留的合相色谱分析方法，具体是利用超高效合相色谱法（UPC²）检测烟草中敌草胺、甲草胺、精喹禾灵、双苯酰草胺、异丙甲草胺、异噁草酮等除草剂的方法。首先，利用QuRChERS方法对烟叶中含有的除草剂进行萃取及初步除杂；其次，为进一步减少基质对检测目标物的干扰，采用弗罗里硅土小柱对提取液进行固相萃取净化处理；第三，采用超高效合相色谱仪对除草剂进行检测，并通过外标法进行定量分析。高效合相色谱仪可以在5分钟之内即可完成所有目标物质的分析，在此过程中有机溶剂用量极少，是一种集高效、灵敏、环保等多种优点于一体的分析方法。

主权项

一种烟草中除草剂残留的合相色谱分析方法，是对烟草中敌草胺、甲草胺、精喹禾灵、双苯酰草胺、异丙甲草胺、异噁草酮六种除草剂残留的测定，其特征在于：首先利用乙腈对样品基质中残留的除草剂进行提取，加入一定量硫酸镁、氯化钠、柠檬酸钠及柠檬酸氢钠进行振荡，离心后吸取一定量的上清液进行氮吹浓缩，然后进行固相萃取对其进行净化处理，氮气吹干后利用乙腈溶剂进行复溶，过0.22 μm有机相滤膜后，利用超高效合相色谱仪对其中的物质进行浓度分析，具体步骤如下：1）样品的提取称取2.0 g已粉碎的烟草样品于50 mL具塞离心管中，加入10 mL超纯水浸润样品，静置10 min；取10 mL乙腈到离心管中，于旋涡混合器上以2000 rpm速度振荡1 min，把离心管放入‑20°C冰箱冷冻10 min；然后向离心管中加入含4 g无水硫酸镁，1 g氯化钠，1 g柠檬酸钠和0.5 g柠檬酸氢钠的盐析试剂包，立即于旋涡混合器上以2000 rpm振荡2 min，以5000 rpm离心3 min，取5mL上清液氮吹浓缩至1 mL；2）样品的固相萃取净化将浓缩好的样品进行固相萃取净化处理，具体操作步骤分为：首先，利用6mL正己烷对弗罗里硅土小柱进行活化处理；其次，将上一步所获得的1 mL浓缩液注入至弗罗里硅土小柱上；第三步，利用5 ml体积比为9:1的正己烷和丙酮的混合液对小柱进行洗涤，收集全部洗涤液；第四步，注入3 mL空气以排净小柱上残留的液体；3）浓缩、复溶及过滤以氮吹仪对步骤2）收集的全部洗涤液浓缩近干，然后加入1 mL乙腈复溶，并利用0.22 μm有机相滤膜对样品进行过滤，作为样品待测液；4)标准工作溶液配制配制系列混合标准工作溶液，使敌草胺、甲草胺、精喹禾灵、双苯酰草胺、异噁草酮浓度分别为0.05 μg/mL、0.1μg/mL、0.25μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、2.5μg/mL，5μg/mL，异丙甲草胺浓度为0.15μg/mL、0.3μg/mL、0.75μg/mL、1.5μg/mL、3.0μg/mL、7.5μg/mL、15μg/mL；5）合相色谱分析采用超高效合相色谱仪对标准工作溶液和样品待测液进行浓度分析，紫外检测器进行检测，外标法定量；色谱条件：采用色谱柱为Acquity UPC² CSH Fluoro‑Phenyl色谱柱；ABPR压力为1800 psi；色谱柱温度为60 ℃；进样量为5‑10 μL；流动相分别为流动相A：CO₂和流动相B：甲醇，流速为1.5 mL/min，流动相梯度洗脱程序如下表；紫外检测波长为210 nm；表1 梯度洗脱程序。