一种批量提取水稻胚乳DNA的方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，公开了一种批量提取水稻胚乳DNA的方法。该方法包括如下步骤：S1.从水稻种子中切取胚乳；S2.将胚乳投入PCR板（T1板）孔中；S3.T1板每孔加入碱液，放入PCR仪中进行加热；S4.取出T1板，每孔投入钨合金珠及1×DNA抽提液；S5.将T1板重新置于PCR仪中进行加热；S6.取出T1板，振动；S7.将T1板放入离心机进行离心；S8.取出T1板，将上清液转移至另一PCR板（T3板）中，T3板每孔中预先加入双蒸水；S9.将T3板置于冰箱中保存。该方法快速、操作简单，可实现水稻胚乳DNA的批量提取。

主权项

一种批量提取水稻胚乳DNA的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1.从水稻种子中切取胚乳，所述胚乳指从每粒水稻种子切取1/3的胚乳；S2.向每个PCR板孔中投入5~8mg胚乳，所述的PCR板命名为T1板；S3.T1板每孔加入100μL碱液，放入PCR 仪中进行加热；S4.取出T1板，每孔投入钨合金珠及180μL 1×DNA抽提液；S5.将T1板重新置于PCR仪中进行加热；S6.取出T1板，振动3~4 min；S7.将T1板放入离心机进行离心；S8.取出T1板，将上清液转移至另一PCR板中，PCR板命名为T3板，T3板每孔中预先加入50~150 μL 双蒸水；S9. 将T3板置于冰箱中保存；其中，S3中所述的碱液为1 mol/ L NaOH溶液，S3中加热的条件为99 ℃，15 min；S4中1×DNA抽提液的组成为pH9.5的Tris、EDTA、 KCl，它们的摩尔比为10:1:100；钨合金珠每孔加入1粒；S5中加热的条件为99 ℃，3 min；S7中以5000 rpm 离心1 min；所述的T1板和T3板为96孔板；S8中使用96针复制器转移上清液。