圆褐固氮菌生物絮凝剂及其制备方法

摘要

本发明涉及一种圆褐固氮菌生物絮凝剂及其制备方法。微生物絮凝剂制备因培养成本高、周期长、发酵后需固液分离，使产品成本增加。本发明用甘露醇、KH₂PO₄、MgSO₄·7H₂O、NaCl、CaCO₃、CaSO₄·2H₂O加水配置发酵培养基；取已活化的圆褐固氮菌的固体斜面菌种，接种至发酵培养基培养得到发酵种子液，按10%的体积比接种至发酵培养基中培养；结束后加入无水乙醇静置沉淀，收集沉淀烘干，得到生物絮凝剂。本发明采用圆褐固氮菌作为絮凝材料，絮凝成分主要为胞外多聚物多糖、粘性荚膜多糖及发酵过程产生的有机酸、氨基酸等，絮凝效果明显，安全性高于传统絮凝剂；发酵液及菌体均为絮凝剂成分，不需要固液分离，减少分离成本；培养周期短，热稳定性好。

主权项

圆褐固氮菌生物絮凝剂的制备方法，其特征在于：由以下步骤实现：步骤一：配置发酵培养基：发酵培养基配方为：甘露醇10.0g，KH₂PO₄ 0.2 g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，NaCl 0.2 g，CaCO₃ 5.0g，CaSO₄·2H₂O 0.1g，调pH至6.8，加水1000mL混合均匀，分装于250 mL三角瓶中，每瓶装液100 mL，121℃灭菌30分钟；步骤二：发酵种子液的培养：取已经活化的圆褐固氮菌的固体斜面菌种，接种至发酵培养基，28℃摇床转速160rpm发酵培养30小时，得到发酵种子液；步骤三：絮凝剂的发酵培养：取发酵种子液按10%的体积比接种至发酵培养基中，28℃摇床转速160rpm发酵培养50小时；步骤四：絮凝剂的制备：发酵结束后，在1L发酵液中搅拌加入3L无水乙醇，使乙醇终浓度为75%，静置放置24小时，待沉淀完全析出，以4000 rpm离心，收集沉淀，50℃烘干，得到圆褐固氮菌生物絮凝剂。