一种块菌与菌根合成方法

摘要

中华块菌与华山松菌根合成方法，涉及一系列程序步骤，即华山松种子和块菌菌种子实体的筛选、无菌树苗的培育、菌剂制备、培养基质的配置、优选及其接种，菌根苗的培养与菌根形态解剖及分子的检测和确认，移植栽培，最终实现人工栽培块菌。

主权项

1、中华块菌与华山松菌根合成方法，包括下述步骤：(1)华山松播种和育苗，A、取4-8℃冰箱内保藏2-12个月的华山松种子，30％H2O2浸泡2小时，无菌水冲洗数次，弃去漂浮的种子，再用无菌水浸泡48小时，捞出，用机械方式使种子轻微破口，复用75％酒精棉纱擦拭消毒，放培养皿中备用；B、基质备用，取未过筛蛭石与珍珠岩按体积比1/1混匀，加入水使其含水量达30％，121-126℃下高压蒸汽灭菌1小时；或者取新生产的蛭石和珍珠岩；C、播种，将(1)A步骤中备好的种子，以开口端向下的方向播入基质，播种深度为1.5-2cm；D、育苗；(2)中华块菌菌剂制备和接种，A、菌剂制备，选2-3月份产的成熟中华块菌，显微镜下观察孢子形态，黑褐色孢子与未成熟黄褐色孢子的比例达95∶5为成熟子囊果，成熟子囊果用自来水清洗干净后，无菌水冲洗3遍，4-8℃冷藏10-20天后，再在-24℃冷冻保存不超过18个月备用；菌剂制备前将冷冻子囊果取出，自然解冻，将每一子囊果切为数块，放置于搅拌机中，加无菌水粉碎，显微镜下镜检，确定95％的子囊游离，5％的孢子从子囊分离出为止，菌剂的浓度为每克子囊果/水＝1/3-5；B、接种基质制备及pH值调整，腐殖质土过筛，适量拌入水，使水分含量30％，高压灭菌3小时备用；腐殖质、水、蛭石以体积比1/1/1的比例混合，加入石灰粉，混匀，调整pH为7，备用；C、接种，按每株接种5×107个孢子的量折算出每株需接种的菌剂的体积，取菌剂浇入基质，拌匀；将步骤(1)所得幼苗自育苗基质中取出，去根末端，将菌的根系全部浸入步骤(2)A制备的菌剂后取出，植入步骤(2)B的接种基质；(3)菌根苗培育，苗置于自然通风大棚，自来水浇灌，干温交替培养，培养温度10-30℃，太阳光照10-14小时。