有机介质中生物合成共轭α-亚麻酸异构体的方法

摘要

有机介质中生物合成共轭α-亚麻酸异构体的方法，包括以下步骤：（1）将干酪乳杆菌CGMCC 1.574菌体重悬于脉冲介质中，经脉冲电场处理后，离心收集菌体；（2）用50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后，离心收集菌体，将每克湿菌体重悬于20mL50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中，加入菌悬液体积0.5-2.0%的吐温-80混合均匀，4-40℃处理2-6h，离心收集菌体，冷冻干燥后得到包衣菌体；（3）将每克包衣菌体加入到600mL正己烷中，搅拌均匀，加入正己烷体积0.1-0.3%的α-亚麻酸，4-40℃下反应1-12h；（4）离心分离包衣菌体，回收正己烷，产物为c9,t11,c15-共轭α-亚麻酸异构体。本发明反应时间短，包衣菌体可重复使用多次，产量得到了显著提高，无环境污染，生产成本显著降低。

主权项

有机介质中生物合成共轭α‑亚麻酸异构体的方法，其特征是包括以下步骤：（1）收集处于对数生长期的干酪乳杆菌CGMCC 1.574菌体，用脉冲介质洗涤后，将菌体重悬于脉冲介质中，菌体浓度为1×10⁹cfu/mL，冰浴10min，经电场强度为10kV/cm、脉冲宽度为20μs的脉冲电场处理10次，每次间隔时间为2s，处理后离心收集菌体；（2）菌体用50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后，离心收集菌体，按每克湿菌体重悬于20mL50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中计，将湿菌体重悬于磷酸盐缓冲液中，加入菌悬液体积百分比0.5‑2.0%的吐温‑80混合均匀，于4‑40℃处理2‑6h，离心收集菌体，将菌体冷冻干燥后得到包衣菌体；（3）按每克包衣菌体加入到600mL正己烷中计，将包衣菌体加入到正己烷中，搅拌均匀，加入正己烷体积百分比0.1‑0.3%的α‑亚麻酸，在4‑40℃下反应1‑12h；（4）离心分离包衣菌体，将正己烷溶液进行减压蒸馏，回收正己烷，产物为c9,t11,c15‑共轭α‑亚麻酸异构体；步骤（1）所述的脉冲介质为100mM的蔗糖，50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液，体积百分比0.1%的吐温‑80。