南极假丝酵母脂肪酶的制备方法

摘要

本发明提供了一种南极假丝酵母脂肪酶的制备方法，属于分子生物学领域。按照毕赤酵母偏爱密码子结构，通过化学方法人工合成了CALB基因，人工合成的DNA分子，编码具有与野生型CALB蛋白在氨基酸水平上具有相同功能的核苷酸序列，所述的核苷酸序列能在中度严谨条件下与SEQ ID NO.1中从核苷酸第1-957位的核苷酸序列杂交。本发明所说基因在毕赤酵母细胞中高效表达，所表达的脂肪酶量达到21.6mg/L，从而提供了一种按毕赤酵母偏爱密码子设计合成在毕赤酵母中表达的南极假丝酵母脂肪酶基因，为解决酶成本高、满足工业大规模生产需要具有重要意义。

主权项

一种南极假丝酵母脂肪酶B的制备方法，其特征在于，按照毕赤酵母偏爱密码子结构，通过化学方法人工合成了南极假丝酵母脂肪酶B基因，该基因如SEQ ID NO.1所示，编码具有与野生型南极假丝酵母脂肪酶B蛋白在氨基酸水平上具有相同功能的核苷酸序列；所述的化学方法，指亚磷酸三酯法，用于核苷酸序列的固相合成；所述的人工合成，指在体外进行的、使用核酸自动合成仪合成核苷酸序列的方法。