一种利用大豆糖蜜发酵生产醋酸的方法

摘要

本发明涉及一种利用大豆糖蜜发酵生产醋酸的方法，以大豆糖蜜作为碳源，再添加所需的培养基，采用酵母菌和醋酸杆菌发酵生产醋酸。采用大豆糖蜜浓度为35%，pH为5.5，酵母菌接种量为10%，28℃酒精发酵96h，调节pH为5.0，醋酸杆菌接种量为10%，30℃发酵120h。该方法利用大豆糖蜜发酵生产醋酸，不仅充分利用了大豆糖蜜中的有效成分，大大提高了其的利用价值，变废为宝，而且减轻了大豆糖蜜对环境的压力。另外由于大豆糖蜜价格低廉，采用其作为发酵底物可以明显降低生产成本。

主权项

一种利用大豆糖蜜发酵生产醋酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）培养基的制备a．酵母菌培养基的制备酵母菌斜面培养基的制备：取马铃薯去皮切块后加入蒸馏水，马铃薯与蒸馏水的比例为：1g：4.8‑5.2 mL，煮沸25‑35min，用纱布过滤，取其滤液，按1g马铃薯加入0.1‑0.15g葡萄糖和0.093‑0.098g琼脂计再加入葡萄糖和琼脂，pH自然，然后加热溶解，灭菌后制备成斜面培养基备用；酵母菌种子培养基的制备：取马铃薯去皮切块后加入蒸馏水，马铃薯与蒸馏水的比值为：1g：4.8‑5.2 mL，煮沸25‑35min，用纱布过滤，取其滤液，按1g马铃薯加入0.1‑0.15g葡萄糖计再加入葡萄糖10g，灭菌后冷却备用；b．醋酸杆菌培养基的制备醋酸杆菌斜面培养基的制备：取酵母膏、葡萄糖和琼脂置于容器中，加入蒸馏水，加热溶解, 灭菌后制备成斜面培养基备用；酵母膏、葡萄糖、琼脂的质量比为：1：0.8‑1.2：1.8‑2.2，蒸馏水的加入量与酵母膏、葡萄糖、琼脂总质量的比例为: 22‑26mL：1g,醋酸杆菌种子培养基的制备：取酵母膏、葡萄糖置于容器中，加入蒸馏水，灭菌后，当培养基的温度降到63‑68℃时加入无水乙醇，备用；酵母膏、葡萄糖的质量比为1：0.8‑1.2，蒸馏水的加入量与酵母膏、葡萄糖总质量的比例为: 48‑53mL：1g, 蒸馏水的加入量与无水乙醇的加入量的比值为：24‑26：1；（2）酵母菌和醋酸杆菌的菌种活化a．酵母菌的菌种活化：以无菌操作方式用接种环取一环的酵母菌菌种到酵母菌斜面培养基中划斜面，放在28‑33℃恒温培养45‑50h；b．醋酸杆菌的菌种活化：以无菌操作方式用接种环取一环的醋酸杆菌菌种到醋酸杆菌斜面培养基中划斜面，放在28‑33℃恒温培养45‑50h；（3）酵母菌和醋酸杆菌的扩大培养a．酵母菌的扩大培养：在无菌操作条件下，用接种环从酵母菌斜面培养基上取2环酵母菌接入45‑55mL酵母菌种子培养基中，置于恒温培养箱中，在25‑30℃条件下培养16‑20h得到酵母种子培养液；b．醋酸杆菌的扩大培养：在无菌操作条件下，用接种环从醋酸杆菌斜面培养基上取2环醋酸杆菌接入45‑55mL醋酸杆菌种子培养基中，密封，置于恒温摇床中，在28‑33℃条件下培养22‑26h得到醋酸杆菌种子发酵液；（4）大豆糖蜜发酵产醋酸取大豆糖蜜加入营养盐(NH₄)₂SO₄、NaHSO₃、KH₂P0₄和MgS0₄，调节pH为5.3‑5.8，加水至总质量为大豆糖蜜质量的2.5‑3倍,密封灭菌后，按8‑12%的接种量接入酵母种子培养液，放置恒温培养箱中25‑30℃发酵90‑100h，而后调节pH为4.8‑5.2，按8‑12%的接种量接入醋酸杆菌种子发酵液，在温度为28‑33℃的摇床培养箱发酵115‑125h；所述的大豆糖蜜与营养盐的重量份数为：大豆糖蜜35份，(NH₄)₂SO₄ 0.1‑0.2份，NaHSO₃ 0.05‑0.07份，KH₂PO₄ 0.4‑0.6份，MgSO₄ 0.4‑0.6份；所述的灭菌是指在121℃灭菌20 min。