从原核生物中纯化人乳头瘤病毒晚期蛋白L1的方法

摘要

本发明提供了一种从大肠杆菌中纯化人乳头瘤病毒晚期蛋白L1的方法。该方法通过对大肠杆菌菌体裂解上清中的L1蛋白进行无盐沉淀、复溶、离子交换层析、疏水层析和复性可以大规模制备电泳纯度达到98％以上的类病毒颗粒。该类病毒颗粒具有良好的免疫原性，能诱导针对同型HPV病毒的中和抗体，可作为预防HPV感染的疫苗。

主权项

一种纯化乳头瘤病毒L1蛋白质的方法，该方法包括如下步骤：(a)获得表达有所述乳头瘤病毒L1蛋白质的原核宿主细胞；(b)将所述原核宿主细胞在重悬溶液中重悬，所述重悬溶液含有足以溶解所述乳头瘤病毒L1蛋白质的浓度的盐，且所述重悬溶液所含盐的浓度是300mM‑500mM；(c)破碎所述原核宿主细胞；(d)除去不溶性部分，获得菌体裂解上清；(e)将菌体裂解上清中盐的浓度降低到所述乳头瘤病毒L1蛋白质足以被选择性沉淀的盐浓度，且降低后的盐浓度低于100mM；和(f)非必需地收获沉淀，其中，步骤(b)中所述重悬溶液所含的盐是中性盐，并且是碱金属盐、铵盐、盐酸盐中的一种或者几种。