一种同时测定9种水溶性维生素的检测方法

摘要

本发明涉及一种同时测定9种水溶性维生素的检测方法，其利用高效液相色谱仪测定水溶性维生素时，采用浓度为10-50mmol/L、pH2.0-3.0的磷酸盐缓冲液-乙腈体系作为流动相，可以有效抑制水溶性维生素组分的解离以增加其在C18色谱柱固定相上的保留时间，并且由于所述磷酸盐缓冲液浓度为10-50mmol/L,流动相具有较大的缓冲容量，从而在向色谱体系引入酸性或碱性样品时，能够保持流动相的pH值不发生变化进而保证了水溶性维生素的分离效果。本发明方法可实现9种水溶性维生素的同时测定，具有分析速度快，灵敏度高，定性和定量准确的特点，适合维生素营养强化食品中水溶性维生素的多组分测定。

主权项

一种同时测定9种水溶性维生素的检测方法，其包括如下步骤：（1）制备硫胺、维生素C、烟酰胺、吡哆醇、泛酸钙、叶酸、氰钴胺、核黄素和生物素的标准品混合溶液，利用高效液相色谱仪对其检测，得到每种水溶性维生素的保留时间，并生成每种所述水溶性维生素其浓度与峰面积之间对应的标准曲线；其中，所述高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱：Agilent Zorbax Eclipse Plus‑C184.6mm×250mm,5μm；流动相A：10‑50mmol/L磷酸盐缓冲液，流动相B：乙腈；洗脱方式：梯度洗脱；柱温：30℃；进样器温度：4℃；进样体积：20μL；流速：1.0mL/min；设置高效液相色谱仪的六通道数据采集波长分别为205nm，246nm，261nm，267nm，283nm和290nm；（2）取样品溶液，利用所述高效液相色谱仪在与步骤（1）相同的条件下对其进行检测，得到所述样品溶液中水溶性维生素的保留时间和检测峰面积；（3）将步骤（2）中获得的所述样品溶液中水溶性维生素的保留时间与步骤（1）中得到的每种所述水溶性维生素的保留时间进行对比，确定样品中水溶性维生素的种类，并利用步骤（1）得到的标准曲线计算样品中水溶性维生素的含量。