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一种红花籽抗氧化肽的制备方法，其特征在于包括如下步骤:（1）原料预处理：以红花籽粕为原料，红花籽粕粉碎，过60目筛，先用正己烷常温浸提，不断搅拌，脱脂三次，每2小时换一次，晾干，再用甲醇常温浸提，不断搅拌，脱苦三次，每2小时换一次，晾干。（2）红花籽蛋白的制备：脱脂脱苦的红花籽粕在 45℃下，1:14 的料液比加水搅拌，然后用 1.0 mol/L NaOH调节到 pH 9.0‑11.0，并保温 1 h，再经 3000 r/min 下离心 10 min。取碱提工艺中的上清液，用 1mol/L HCl 调 pH 值为5.0‑6.0，再经5000 r/min 下离心 10min，用去离子水洗涤沉淀三次，用 1 mol/L NaOH 调 pH 至 7.0，经冷冻干燥，得到红花籽蛋白。（3）蛋白酶的筛选：根据各种蛋白酶的作用方式和作用位点不同，选取碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶及风味蛋白酶4种酶，配制一系列3%的红花籽蛋白溶液，混匀后分别在每种蛋白酶最适宜的温度和pH值条件下水解2h,100℃灭酶10min,3500r/min，离心10min,取上清液测定酶解液的还原能力。选用以水解液的还原力作为评价抗氧化效果的指标，筛选出较合适的蛋白酶。（4）红花籽抗氧化肽的制备：用缓冲溶液配制成质量浓度为1%‑7%的红花籽蛋白溶液，搅拌均匀，调节pH9.0‑11.0，然后加蛋白酶4000‑10000u/g，在35‑65℃水浴中水解1‑4h，水解过程中保持pH恒定，酶解液在沸水浴中加热5‑15min灭酶，然后3500r/min离心15min，取上清液，调节pH为中性，最后经浓缩和冷冻干燥，得到红花籽抗氧化肽。 |
