Notch配体Delta-like1融合蛋白的纯化与复性的方法

摘要

一种Notch配体Delta-like1融合蛋白的纯化与复性的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将含有HD1R的包涵体用洗涤缓冲液多次洗涤、离心，溶解于强变性剂缓冲液中，得到粗分离的HD1R蛋白；2)将含有人胰岛素原变性抽提液直接进样到流动相A平衡的色谱柱，再用PBS、1mol/LNaCl或Tris、1mol/LNaCl的流动相B线等度洗脱，收集目标峰色谱馏分，得到复性与纯化后的HD1R的色谱馏分；3)将收集的目标峰色谱馏分直接进样，用20mmol/LPBS的流动相平衡的色谱柱进一步脱盐，持续洗脱30min，洗脱流速为0.5-1.5ml/min，得到复性与纯化更高纯度和活性的色谱馏分；本发明方法工艺简单，可实现规模化生产，所得到的高产量和高纯度的馏分可为Notch信号途径的深入研究提供可靠的实验材料。

主权项

一种Notch配体Delta‑like1融合蛋白的纯化与复性的方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将含有HD1R的包涵体用洗涤缓冲液多次洗涤、离心，溶解于强变性剂缓冲液中，得到粗分离的HD1R蛋白；2)将含有人胰岛素原变性抽提液直接进样到流动相A平衡的色谱柱，再用PBS、1mol/LNaCl或Tris、1mol/LNaCl的流动相B线等度洗脱，收集目标峰色谱馏分，得到复性与纯化后的HD1R的色谱馏分；3)将收集的目标峰色谱馏分直接进样，用20mmol/LPBS的流动相平衡的色谱柱进一步脱盐，持续洗脱30min，洗脱流速为0.5‑1.5ml/min，得到复性与纯化更高纯度和活性的色谱馏分。