一种傅立叶红外法测定微藻生物大分子含量的方法

摘要

发明涉及一种傅立叶红外法测定微藻生物大分子含量的方法；从自然水体采集纯培养的藻株，培养到OD680达到1.0，将藻液离心，去清液，浓缩加入丙三醇；采用FTIR ReactIR^TM45m傅立叶红外光谱仪对待测样品进行1000-3000cm^-1的连续检测分析；FT-IR检测本底：利用软件iC Quant^TM对结果进行统计分析的生物大分子的实际含量；将测定结果代入公式计算油脂A_L、蛋白质A_p与碳本水化合物A_c的生物大分子的含量T_L(mg)、T_P(mg)、T_C(mg)；本方法可以对细胞无伤害的同时快速检测出微藻油脂含量，蛋白质和碳水化合物的含量。

主权项

一种傅立叶红外法测定微藻生物大分子含量的方法，其特征在于：包含如下步骤：1）藻种的准备：从自然水体采集的样品经过分离筛选获得纯培养的藻株，扩大培养到100ml，培养基为BG‑11培养基，藻株处于对数生长期，OD680达到1.0，准备FT‑IR分析；如果已经是纯培养的藻株只需活化处理使藻株处于对数生长期，扩大培养到100ml，培养基为BG‑11培养基，OD680达到0.8，准备FT‑IR分析；2）浓缩藻液：将上述100ml藻液6000rpm离心5分钟，去除上清液，浓缩100倍，加入1ml的BG‑11液体培养基；3）添加抗干扰剂：为减少水对红外吸收的影响，加入丙三醇，使其终浓度为40%；4）FT‑IR检测样品：采用FTIR ReactIR^TM45m傅立叶红外光谱仪对上述待测样品进行1000‑3000cm^‑1的连续检测分析；5）FT‑IR检测本底：采用FTIR ReactIR^TM45m傅立叶红外光谱仪对含有40%丙三醇1ml的BG‑11培养基进行1000‑3000cm^‑1的连续检测分析，作为对照和本底初始值；6）数据统计分析：利用软件iC Quant^TM对步骤4和步骤5的结果进行统计分析，并用步骤4的结果减去步骤5的结果即为待测样品中生物大分子的实际含量；7）结果计算：将上述测定结果按以下公式计算油脂A_L、蛋白质A_p与碳水化合物A_c的生物大分子的含量T_L(mg)、T_P(mg)、T_C(mg)；A_L=‑2.30+78.96×T_LA_P=‑0.27+12.72×T_PA_C=0.07+2.05×T_C。