发明名称 一种从猪睾丸中提取玻璃酸酶的方法
摘要 本发明提供了一种从猪睾丸中提取玻璃酸酶的方法,采用酸液提取和硫酸铵盐析得玻璃酸酶粗品,粗品再经超滤、热原处理、冻干得玻璃酸酶精品。本发明选用猪睾丸为原材料,采用高速离心和过滤提取方法,对玻璃酸酶进行分离和纯化,使玻璃酸酶效价可以达到340iu/mg。
申请公布号 CN103060288B 申请公布日期 2014.11.26
申请号 CN201210598003.0 申请日期 2012.12.30
申请人 青岛九龙生物医药有限公司 发明人 宋超龙;刘振海;刘珍;王议锋
分类号 C12N9/26(2006.01)I 主分类号 C12N9/26(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种从猪睾丸中提取玻璃酸酶的方法,其特征在于,由以下步骤组成: 1.提取: 将猪睾丸除内外皮层及付睾丸,绞成糜浆;称取糜浆,按每1kg糜浆加酸液1.0‑1.5L的比例,加酸液搅拌,浸出4小时后,将浸出液过滤,滤液调pH3.2~4.0;取滤渣,按每1kg开始加入的糜浆加酸液0.2‑0.3L的比例,加酸液搅拌1小时后,再次过滤,滤液调pH3.2~4.0;所述酸液为冰醋酸,盐酸,氯化钠和水的混合酸液; 2.粗制: 合并两次过滤液,在不断搅拌下,以每1L加硫酸铵230‑260克的比例,加入固体硫酸铵,搅拌溶解,静置10小时,过滤,留固体,量取滤液,在不断搅拌下,按1L滤液加硫酸铵280‑310克的比例,加入固体硫酸铵,搅拌溶解,静置10小时,过滤,合并两次固体,得粗品; 3.精制: 3.1超滤 粗品溶于少量水中,进超滤装置进行超滤; 3.2热原处理: 将超滤液离心20‑30分钟,转速2700‑3200r/min,过滤,将滤液放冰浴中冷却,加入滤液0.1体积的15%磷酸三钠溶液,在不断搅拌下,缓缓加入滤液0.06体积的20%醋酸钙溶液,并以NaOH溶液调pH8‑9,离心,时间20分钟~30分钟,转速2700‑3200r/min,收集上清液,之后上清液调pH6.5~7.0; 3.3冻干 将滤液冷冻干燥,即得无热原的玻璃酸酶精品。 
地址 266100 山东省青岛市崂山区株洲路97号
您可能感兴趣的专利