主权项 |
一种从猪睾丸中提取玻璃酸酶的方法,其特征在于,由以下步骤组成: 1.提取: 将猪睾丸除内外皮层及付睾丸,绞成糜浆;称取糜浆,按每1kg糜浆加酸液1.0‑1.5L的比例,加酸液搅拌,浸出4小时后,将浸出液过滤,滤液调pH3.2~4.0;取滤渣,按每1kg开始加入的糜浆加酸液0.2‑0.3L的比例,加酸液搅拌1小时后,再次过滤,滤液调pH3.2~4.0;所述酸液为冰醋酸,盐酸,氯化钠和水的混合酸液; 2.粗制: 合并两次过滤液,在不断搅拌下,以每1L加硫酸铵230‑260克的比例,加入固体硫酸铵,搅拌溶解,静置10小时,过滤,留固体,量取滤液,在不断搅拌下,按1L滤液加硫酸铵280‑310克的比例,加入固体硫酸铵,搅拌溶解,静置10小时,过滤,合并两次固体,得粗品; 3.精制: 3.1超滤 粗品溶于少量水中,进超滤装置进行超滤; 3.2热原处理: 将超滤液离心20‑30分钟,转速2700‑3200r/min,过滤,将滤液放冰浴中冷却,加入滤液0.1体积的15%磷酸三钠溶液,在不断搅拌下,缓缓加入滤液0.06体积的20%醋酸钙溶液,并以NaOH溶液调pH8‑9,离心,时间20分钟~30分钟,转速2700‑3200r/min,收集上清液,之后上清液调pH6.5~7.0; 3.3冻干 将滤液冷冻干燥,即得无热原的玻璃酸酶精品。 |