哺乳动物细胞表达系统

摘要

本发明涉及一种高效稳定的哺乳动物细胞表达系统，该表达系统应用新型的高效表达载体，将目标基因在合适的哺乳动物宿主细胞株中进行高效表达。利用本发明的表达系统可以显著提高目标基因在宿主细胞中的表达水平，同时大大减少筛选高表达细胞株的时间和成本，实现目标蛋白在哺乳动物细胞中的高产量稳定表达。

主权项

一种哺乳动物细胞表达载体，其特征在于，所述的哺乳动物表达载体仅含有单个表达框，由一个强启动子带动目标基因、筛选标记基因和扩增标记基因的表达，这些基因之间通过IRES序列连接；所述的单个表达框由如下顺序排列原件构成：(a)强启动子，(b)目标基因的克隆位点，(c)合成的IRES元件，(d)扩增标记基因，(e)FMDV IRES元件，(f)合成的大肠杆菌EM7元件，(g)筛选标记基因，(h)转录终止子，和(i)启动在大肠杆菌中起始复制的PUC序列；所述的强启动子为CMV启动子，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述的合成的IRES元件为FMDV IRES序列或合成的GTX IRES序列，所述的FMDV IRES核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述的合成的GTX IRES核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；所述的扩增标记基因为DHFR基因或GS基因；所述的筛选标记基因为GFP、ZEO、HYP、NEO或RFP。