基于胞外α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的工程菌及其实现方法

摘要

一种生物工程技术领域的基于胞外α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶的工程菌及其实现方法，该阿拉伯呋喃糖苷酶基因克隆自灰略红链霉菌(Streptomyces griseus)JSD-1，将其连接到表达载体上得到重组表达载体，进一步将该重组表达载体导入大肠杆菌并诱导合成阿拉伯呋喃糖苷酶。本发明克服现有技术中阿拉伯呋喃糖苷酶多为诱导表达，表达量较低等不足，应用基因工程菌表达本发明所述的基因制备阿拉伯呋喃糖苷酶，可为工业化发酵生产α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶提供一种新方法。

主权项

一种基于胞外α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶的工程菌，其特征在于，该工程菌为外源表达胞外α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶的DH5α大肠杆菌；所述的胞外α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶具体为β‑1,4‑胞外α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示；所述的β‑1,4‑胞外α‑L‑阿拉伯呋喃糖苷酶具有Sg‑Abl基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，其长度为1473个碱基对，共编码490个氨基酸，切除前35个氨基酸信号肽序列后的成熟蛋白加入起始氨基酸M共456个氨基酸，分子量为49.9KD。