利用TAT核心肽段促进外源蛋白可溶性表达的方法及其专用表达载体

摘要

本发明公开了一种利用TAT核心肽段促进原核表达体系高效、可溶性表达外源蛋白的方法及其专用表达载体。该专用表达载体是含有一个或多个TAT核心多肽编码区的原核表达载体。该方法包括以下步骤：1)将外源基因插入该专用表达载体中，得到含有TAT核心多肽编码区和外源基因的原核表达载体；2)将原核表达载体向原核表达体系转化；3)原核表达载体的诱导表达；4)外源蛋白的制备。经检测，表达产物主要以可溶性的形式存在宿主菌裂解上清中，且占裂解上清总蛋白的25-30％，可以获得高产量的外源蛋白，可大量制备具有生物活性的外源蛋白。

主权项

一种利用TAT核心肽段促进外源蛋白脑红蛋白NGB或增强型绿色荧光蛋白EGFP高效、可溶性表达的专用表达载体，是含有一个TAT核心多肽编码区的原核表达载体，用于构建所述专用表达载体的出发载体为pET28b；所述TAT核心多肽编码区的核苷酸序列如序列表中序列2所示，置于外源蛋白编码序列的上游。