一种染料亲和磁性微球的制备及用于乳清中乳铁蛋白分离的应用

摘要

本发明公开了一种染料亲和磁性微球的制备方法及其采用该染料亲和磁性微球分离乳清中乳铁蛋白的应用，本发明在磁性Fe3O4纳米粒子的表面制备了具有分离功能的染料亲和吸附剂，包括磁性壳聚糖微球的制备和活性红120染料功能化，在Fe3O4纳米粒子表面功能化后得到的亲和吸附剂对乳清中的乳铁蛋白具有分离性能，且该染料亲和磁性微球可以重复使用。

主权项

一种染料亲和磁性微球的制备方法，其特征在于，按如下步骤进行：步骤一，磁核材料制备：A）利用化学共沉淀法制备Fe3O4纳米粒子，各试剂的质量比配方为：FeCl3·6H2O：FeCl2·4H2O：H2O=2.3751：0.8735：250；B）称取FeCl3·6H2O和FeCl2·4H2O，溶解于去离子水中，于500rpm搅拌速率下搅拌至透明；C）通入氮气（N2）10～15min以排除空气；D）滴加氨水调pH>10，搅拌10min，80℃水浴保温30min，得到沉淀物；E）将沉淀物分别用乙醇和去离子水洗涤3次，得到Fe3O4纳米粒子；步骤二，磁核表面壳聚糖修饰：A）将步骤一制备的Fe3O4纳米粒子1g加入盛有200mL石蜡和10mLSpan–80的烧杯中，搅拌均匀；B）称取1.5g壳聚糖，溶解于50mL质量浓度为5%的醋酸水溶液中；C）将两种液体混合，并于800rpm的搅拌速率下搅拌30min；D）加入2.5mL25%戊二醛，并于800rpm继续搅拌30min；E）加入2.5mL25%戊二醛，并于800rpm再搅拌2h，60℃水浴中保温2h；F）去除上清液后的沉淀物用石油醚、丙酮、无水乙醇清洗，在40℃烘箱中干燥24h，即得磁性壳聚糖微球。步骤三，磁性壳聚糖微球的表面功能化：A）取步骤二得到的磁性壳聚糖微球2g，加入到200mL浓度为2mg/mL的活性红120溶液中，60℃水浴搅拌30min；B）加入10mL浓度3.4mol/L的NaCl溶液，继续搅拌30min；C）加入4mL浓度2.4mol/L的Na2CO3溶液，在80℃反应4h；D）反应结束后，将得到的磁性壳聚糖微球分别用50℃～60℃的温水、甲醇、2mol/L的NaCl，6mol/L的尿素和蒸馏水洗涤，即得活性红120功能化了的磁性亲和微球。