| 主权项 |
一种经由器官发生再生高粱的方法，其包括步骤：（a）在第一培养基中培养高粱外植体4周至8周，所述第一培养基包括MS矿物盐、N6维生素、25mg至200mg L‑脯氨酸、50mg至250mg L‑谷氨酰胺、碳源、2.26μM至9.04μM 2,4‑二氯苯氧基乙酸（2,4‑D）和0.94μM至18.9μM脱落酸（ABA），使子叶节区内或周围的胚芽膨胀并形成愈伤组织，即SCPC，其中所述高粱外植体是切开的具胚子叶，其根组织被除去；并且从所述外植体完全除去凸出的根组织；（b）损伤所述SCPC并在第二培养基中培养损伤的SCPC 3天至7天，所述第二培养基包括MS矿物盐、B5维生素、100mg至1000mg L‑脯氨酸、100mg至1000mg L‑谷氨酰胺、2mg至20mg L‑甘氨酸、1.42μM至11.36μM抗坏血酸、0.25g至1.5g聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、0.25g至1.5g聚乙烯聚吡咯烷酮（PVPP）、0.2mg至1.5mg AgNO3、碳源和2.26μM至9.04μM 2,4‑D，以诱导茎叶芽；（c）在第三培养基中培养具有诱导茎叶芽的组织7天至15天，所述第三培养基包括MS矿物盐、B5维生素、100mg至1000mg L‑谷氨酰胺、5mg至25mg L‑甘氨酸、0.25g至1.5g PVP、25mg至200mg硫酸腺嘌呤（AdSO4）、0.5g至1.5g干酪素水解物（CH）、碳源、0.56μM至2.24μM 2,4‑D、4.43μM至13.29μM 6‑苄基氨基嘌呤（BA）和2.32μM至18.56μM激动素，以增强茎叶芽增殖和生长；（d）将所述具有增殖中的茎叶芽的组织分成具有增殖中的茎叶芽的组织簇；（e）在第四培养基中培养具有增殖中的茎叶芽的组织簇1周至3周，所述第四培养基包括MS矿物盐、B5维生素、5mg至25mg L‑甘氨酸、25mg至200mg AdSO4、碳源、4.43μM至13.29μM BA和0.72μM至2.88μM赤霉酸（GA3），以增强茎叶生长；（f）在第五培养基中培养具有生长中的茎叶的组织1周至3周，所述第五培养基包括MS矿物盐、B5维生素、5mg至25mg L‑甘氨酸、0.25g至1.5gPVP、25mg至200mg AdSO4、碳源、4.43μM至13.29μM BA和0.72μM至2.88μM GA3，以进一步增强茎叶生长；（g）在第六培养基中培养具有生长中的茎叶的组织1周至3周，所述第六培养基包括MS矿物盐、B5维生素、5mg至25mg L‑甘氨酸、0.25g至1.5g PVP、25mg至200mg AdSO4、碳源和2.85μM至11.4μM吲哚‑3‑乙酸（IAA），以诱导生根。 |
