基于叶酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒的靶向MRI造影剂的制备方法

摘要

本发明涉及一种基于叶酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒的靶向MRI造影剂的制备方法，包括：FA连接到NH2-PEG-COOH上形成COOH-PEG-FA；水热法合成PEI包覆的Fe3O4纳米颗粒（Fe3O4-PEI）；Fe3O4-PEI纳米颗粒表面修饰异硫氰酸荧光素(FI)；COOH-PEG-FA连接到Fe3O4纳米颗粒的表面；最后对Fe3O4纳米颗粒表面PEI剩余氨基进行乙酰化修饰以增加其生物相容性，用于MRI成像诊断。本发明工艺简单，反应条件温和，易于操作；制备的Fe3O4磁性纳米颗粒具有良好的胶体稳定性、生物相容性和肿瘤靶向性，在体内肿瘤靶向诊断领域具有潜在的应用价值。

主权项

一种基于叶酸修饰的四氧化三铁纳米颗粒的靶向MRI造影剂的制备方法，包括：（1）将亚铁盐溶解于超纯水中，加入NH3·H2O并于空气气氛下搅拌，然后将混合溶液转移到高压反应釜中，并将0.1g/mL的超支化聚乙烯亚胺PEI水溶液也加入到高压反应釜中，搅拌混合均匀后，于130～140℃反应2～4小时；反应结束后，自然冷却至室温，将沉淀分离洗涤纯化后，即得PEI包裹的四氧化三铁纳米颗粒Fe3O4‑PEI；（2）将FA溶解于DMSO中后，先用EDC和NHS活化2～4h，然后逐滴加入到NH2‑PEG‑COOH的DMSO溶液中，搅拌反应2～4天，透析，然后真空冷冻干燥，即得COOH‑PEG‑FA；（3）将步骤（1）中制备的Fe3O4‑PEI纳米颗粒用DMSO洗涤后，重新分散于DMSO中，再将DMSO溶解的FI溶液加入到上述Fe3O4‑PEI的DMSO溶液中，搅拌反应1～3天后，产物Fe3O4‑PEI‑FI分离洗涤，然后分散到DMSO中；（4）步骤（2）中制备的COOH‑PEG‑FA以及EDC和NHS溶解于DMSO后，搅拌活化2～4h；然后将活化的COOH‑PEG‑FA溶液加入到步骤（3）制备的Fe3O4‑PEI‑FI溶液中，搅拌反应2～4天，再分离洗涤，并分散于超纯水中，得到Fe3O4‑PEI‑FI‑PEG‑FA纳米颗粒水溶液；（5）向步骤（4）制备的Fe3O4‑PEI‑FI‑PEG‑FA纳米颗粒水溶液中加入三乙胺，并搅拌20～40分钟；然后向上述溶液中加入乙酸酐，继续搅拌反应20～30小时；分离洗涤并分散于超纯水中，即得。