主权项 |
一种作物细胞育种的新方法,包括如下步骤:(1)选取若干作物基因型花药离体培养,筛选出高培养力的作物骨干亲本,(2)将作物骨干亲本与主栽品种杂交,采用花药离体培养,得到动态骨干亲本簇作物新品系,(3)将高培养力的作物骨干亲本与动态骨干亲本簇作物新品系复合杂交得到新的动态骨干亲本簇,再复合杂交累加;所述作物为禾本科植物或十字花科植物,所述禾本科植物为小麦,大麦,玉米或水稻,所述十字花科植物为油菜或白菜,所述高培养力为愈伤组织诱导率高、绿苗分化率高、绿苗产率高,所述高培养力的作物为小麦品系H60261;所述花药离体培养的步骤如下:(1)选取适期小麦幼穗,湿布包裹于4℃下预处理24‑48h;(2)剥出幼穗,用0.1%HgCl2消毒,无菌蒸馏水冲冼后,用镊子逐一取出花药置于诱导培养基上暗培养;(3)诱导出的愈伤组织长至直径1‑2mm时,转入分化培养基于光照下进行分化培养;(4)分化苗高达3cm左右时转入绿苗促壮培养基,壮苗培养;(5)当花粉植株长至6‑7cm时,转移至4℃下的冰箱中越夏至正季时节,移栽到大田中,所述诱导培养基pH5.8,组成为:大量元素:KNO31400.0mg/l,CaCl22H2O 150.0mg/l,MgSO47H2O 150.0mg/l,NH4NO3300.0mg/l,KH2PO4400.0mg/l;微量元素:MnSO44H2O 11.2mg/l,ZnSO47H2O8.6mg/l,H3BO36.2mg/l,KI 0.83mg/l,CuSO45H2O0.025mg/l,CoCl26H2O0.025mg/l;有机生长素:肌醇100.0mg/l,甘氨酸2.0mg/l,B1盐酸硫胺素1.0mg/l,B6盐酸吡哆醇0.5mg/l,烟酸0.5mg/l;D‑生物素1.5mg/l;铁盐:FeSO47H2O 27.9mg/l,Na2EDTA37.3mg/l;2,4‑D 2.0mg/l;KT 0.5mg/l;Casein Hydrolysate 100mg/l;琼脂7000mg/l;蔗糖90000mg/l;所述暗培养的条件为32℃暗培养2天,然后27℃‑29℃暗培养;所述分化培养基的pH5.8,组成为:大量元素:NH4NO31650.0mg/l,KNO31900.0mg/l,CaCl22H2O 440.0mg/l,MgSO47H2O370.0mg/l,KH2PO4170.0mg/l;微量元素:MnSO4H2O22.3mg/l,ZnSO47H2O8.6mg/l,H3BO36.2mg/l,KI0.83mg/l,Na2MoO42H2O 0.25mg/l,CuSO45H2O0.025mg/l,CoCl26H2O0.025mg/l;有机生长素:肌醇100.0mg/l,烟酸0.5mg/l,盐酸硫胺素0.4mg/l,盐酸吡哆醇0.5mg/l,甘氨酸2.0mg/l;铁盐:FeSO47H2O27.9mg/l,Na2EDTA37.3mg/l;NAA1.0mg/l;KT 1.0mg/l;琼脂7000.0mg/l;蔗糖30000.0mg/l;所述分化培养的条件为24℃‑26℃,每天光照14‑16h;所述绿苗促壮培养基的pH5.8,组成为:大量元素:NH4NO3825.0mg/l,KNO3850.0mg/l,CaCl22H2O 220.0mg/l,MgSO47H2O185.0mg/l,KH2PO485.0mg/l;微量元素:MnSO4H2O22.3mg/l,ZnSO47H2O8.6mg/l,H3BO36.2mg/l,KI 0.83mg/l,Na2MoO42H2O 0.25mg/l,CuSO4 5H2O0.025mg/l,CoCl26H2O0.025mg/l;有机生长素:肌醇100.0mg/l,烟酸0.5mg/l,盐酸硫胺素0.4mg/l,盐酸吡哆醇0.5mg/l,甘氨酸2.0mg/l;铁盐:FeSO47H2O27.9mg/l,Na2EDTA37.3mg/l;NAA 0.2mg/l;琼脂7000.0mg/l;蔗糖30000.0mg/l;所述壮苗培养的条件为24℃‑26℃,每天光照14‑16h。 |