| 主权项 |
一种芒属植物五节芒体胚组培快速繁殖方法，其步骤是：A、幼穗选取：选取处于颍花原基形成期的幼穗；B、用初代诱导培养基进行初代诱导：将其剪成2‑3厘米小段，先用75%体积比的酒精消毒30‑35s，然后用0.1%质量体积比的氯化汞浸泡3‑5分钟，再用无菌水冲洗3‑5次，将其接种在幼穗的初代诱导培养基上，经过30‑35天的初代诱导，获得胚性愈伤，培养条件为24‑28℃，每天光照14‑16小时，光强为2000LX，初代诱导培养基为：A：MS培养基附加激动素KT 1‑5mg/L，萘乙酸NAA 0.1‑0.5mg/L，蔗糖30g/L,PhytagelR 3g/L；或B：MS培养基附加激动素KT 1‑7mg/L,萘乙酸NAA 0.1‑0.5mg/L，6水氯化镁MgCl2·6H2O 800mg/L,蔗糖30g/L，PhytagelR 3g/L；采用A、B中的任何一种初代诱导培养基都能诱导出胚性愈伤组织，生长9‑11天在幼穗基部开始岀愈，为白色或淡黄色松散愈伤；C、用生苗培养基对生苗继代培养：所获得的胚性愈伤在生苗培养基上继代生苗，25‑30天继代一次，增殖系数为5‑6，培养条件为24‑28℃，每天光照14‑16小时，光强为2000LX，生苗培养基配方为：A：MS培养基附加激动素KT 1‑2mg/L，萘乙酸NAA 0.1‑0.3mg/L，蔗糖30g/L，活性炭3‑8g/L，PhytagelR 3g/L；或B：MS培养基附加激动素KT 1‑2mg/L，萘乙酸NAA 0.1‑0.3mg/L，6水氯化镁MgCl2·6H2O 800mg/L，蔗糖30g/L，活性炭3‑8g/L，PhytagelR 3g/L；将胚性愈伤转到A、B中任何一种生苗培养基之后2‑4天，愈伤开始转绿，6‑8天开始分化出芽，9‑11天形成小幼苗；D、用生根诱导培养基进行生根诱导：所生幼苗在生根诱导培养基上诱导生根，培养25‑30天，培养条件为24‑28℃，每天光照14‑16小时，光强为2000LX，生根诱导培养基为：A：1/2MS培养基附加激动素KT2‑3mg/L，萘乙酸NAA 0.1‑0.5mg/L，蔗糖30g/L，PhytagelR3g/L；或B：MS培养基附加激动素KT 2‑3mg/L，萘乙酸NAA 0.1‑0.3mg/L，蔗糖30g/L，活性炭3‑8g/L，PhytagelR3g/L；长到10‑15厘米的幼苗转到A、B中任意一种生根诱导培养基上，4‑6天幼苗分化出白色或黄色的根；E、驯化移栽：在温室内，将生长健壮的、株高在10‑15厘米的组培苗移栽到由蛭石组成的驯化苗圃中驯化，每天定期给幼苗喷施驯化培养液和清水，15－20d后，移栽到苗圃中，温室条件为15℃‑25℃，照明使用卤光，每天光照14‑16小时，光照强度为2000LX，获得五节芒幼苗。 |
