食源性致病菌核酸高效提取方法

摘要

食源性致病菌核酸高效提取方法，PCR技术目前已被广泛用于病原微生物的检测。PCR检测技术的第一步就是模板核酸的制备，即样本中核酸的提取，这直接影响着PCR反应的结果。长期以来，样本中核酸的提取和纯化一直是耗时、繁琐的过程，严重减慢了检测速度。因此，许多学者一直在探索各种核酸的提取方法。本发明其组成包括：将细菌培养液离心，向离心沉淀中加入缓冲液A，震荡并加入溶菌酶，温育后加入蛋白酶K，加入缓冲液B，剧烈振荡后，在温度65℃温育10分钟，制成裂解溶液，通过硅基质SiO2材料的吸附膜收集高质量的核酸提取核酸溶液。本发明应用于病原微生物的检测。

主权项

一种食源性致病菌核酸高效提取方法，其组成包括：将细菌培养液离心，其特征是：向离心沉淀中加入缓冲液A,震荡并加入溶菌酶，温育后加入蛋白酶K,加入缓冲液B,剧烈振荡后，在温度65 ℃温育10 分钟,制成裂解溶液，通过硅基质SiO2材料的吸附膜收集高质量的核酸提取核酸溶液，能同时提取8种菌，包括G+菌和G‑菌，并满足PCR‑ DHPLC检测条件的要求；所述的缓冲液A：20 mol/ L三羟甲基氨基甲烷TrisHCI、2 mol/ L乙二胺四乙酸EDTA、1.2%聚乙二醇辛基苯基醚Triton；所述的缓冲液B：0. 05 moL/ L三羟甲基氨基甲烷TrisHCI、 pH为7.6的0.1mol/ L氯化钠NaCI、0. 05 mol/ L乙二胺四乙酸EDTA、2 %十二烷基硫酸钠SDS。