无糖型复方扶芳藤制剂中3种主要活性成分的同时检测方法

摘要

本发明提供一种可用于同时检测无糖型复方扶芳藤制剂中3个主要活性成分含量的测定方法。该法采用超声辅助萃取法提取，以HILIC亲水色谱柱为固定相，乙腈-水为流动相，只用一个色谱条件便可同时测定该制剂中卫矛醇、黄芪甲苷、人参皂苷Rb1的含量。经科学实验证明，该法简便、快速、准确性和重复性好，可用于各种剂型的无糖型复方扶芳藤制剂产品(如合剂、胶囊、片剂)的质量控制。

主权项

一种无糖型复方扶芳藤制剂中3种主要活性成分含量的同时检测方法，其特征在于检测方法包括以下步骤：(1)色谱条件：以HILIC亲水色谱柱phenomenex Luna HILIC为固定相，其规格为250mm×4.6mm i.d.，5μm；乙腈‑水为流动相，梯度洗脱，其梯度洗脱的体积百分比条件是：0～5min 93％乙腈，5～15min 93％～80％乙腈，15～25min 80％乙腈；柱温为25～30℃；流速为1ml/min；检测器为蒸发光散射检测器；色谱柱柱效以黄芪甲苷峰计算不小于15000；(2)对照品溶液的制备：①对照品溶液I的制备：取黄芪甲苷和人参皂苷Rb1对照品适量，精密称定，置容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，制得含黄芪甲苷0.5～0.6mg/ml和人参皂苷Rb10.1～0.2mg/ml的混合对照品溶液，即得；②对照品溶液II的制备：取卫矛醇对照品适量，精密称定，置容量瓶中，先加少量水溶解，再加含35％甲醇的水溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，制得浓度为0.8～1mg/ml的卫矛醇对照品溶液，即得；(3)供试品溶液的制备：①复方扶芳藤胶囊或片剂供试品溶液I的制备：取本品装量差异项下的胶囊内容物或复方扶芳藤片研细，取相当于原药材15‑25克的细粉，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入水饱和正丁醇50ml，密塞，超声提取45min，放冷，滤过，残渣用水饱和正丁醇少量多次洗涤，收集滤液和洗涤液，用氨试液洗涤，弃去氨水层，分取正丁醇层水浴蒸干，残留物加甲醇溶解并定容至5ml，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液I；②复方扶芳藤胶囊或片剂供试品溶液II的制备：取上述供试品溶液I制备项下正丁醇提取后留下的残渣，置100ml具塞锥形瓶中，精密加入含30％‑40％甲醇的水溶液50ml，密塞，称重，超声30min，放冷，补足重量，滤过，取续滤液1ml于5ml容量瓶，加含30％‑40％甲醇的水溶液至刻度，摇匀；用孔径为0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液II；③无糖型复方扶芳藤合剂供试品溶液I的制备：精密吸取相当于原药材15‑25克的合剂样品，加水饱和的正丁醇50ml，振摇均匀，超声20min，分取正丁醇层，用氨试液洗涤，弃去氨水层，减压回收正丁醇，残渣用甲醇溶解并定容到5ml，用孔径为0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液I；④无糖型复方扶芳藤合剂供试品溶液II的制备：取供试品溶液I制备项下正丁醇萃取后留下的下层液，蒸至稠膏状，加适量硅藻土拌样分散均匀，转移至100ml具塞锥形瓶中，精密加入含30％‑40％甲醇的水溶液50ml，称重，超声30min，放冷，补足重量，滤过，取续滤液1ml于5ml容量瓶，加含30％‑40％ 甲醇的水溶液至刻度，摇匀；用孔径为0.45μm的微孔滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液II；(4)测定方法①黄芪甲苷、人参皂苷Rb1含量测定法：分别精密吸取黄芪甲苷、人参皂苷Rb1标准混合溶液5μl、10μl及供试品溶液I 10μl，注入高效液相色谱仪，测定相应峰面积，以外标两点法对数方程计算黄芪甲苷和人参皂苷Rb1的含量，即得；②卫矛醇含量测定法：分别精密吸取卫矛醇标准溶液2μl、5μl及供试品溶液II 5μl，注入高效液相色谱仪，测定相应峰面积，以外标两点法对数方程计算卫矛醇含量，即得。