通过终止密码子连读的多肽同种型的细胞表面展示

摘要

本发明尤其涉及用于产生或选择表达所希望的水平的目的多肽的真核宿主细胞的方法，其包括：a)提供多个包含异源核酸的真核宿主细胞，该异源核酸包含至少一个盒(Cas-POI)，该盒(Cas-POI)至少包含编码目的多肽的第一多核苷酸(Pn-POI)、至少一个处于该第一多核苷酸下游的终止密码子，和处于该终止密码子下游的编码免疫球蛋白跨膜锚或其功能性变体的第二多核苷酸；b)培养该真核宿主细胞，以允许表达目的多肽，使得至少部分目的多肽表达为包含该免疫球蛋白跨膜锚或其功能性变体的融合多肽，其中该融合多肽展示在该宿主细胞表面；c)根据展示在细胞表面的融合多肽的存在或量选择至少一个真核宿主细胞。本发明还提供包含这样设计的异源核酸的宿主细胞和用于使用这些宿主细胞产生多肽的方法。

主权项

用于选择至少一个表达希望水平目的多肽的真核宿主细胞的方法，其包括：a)提供多个包含异源核酸的真核宿主细胞，所述异源核酸包含至少一个盒(Cas‑POI)，所述盒(Cas‑POI)至少包含编码目的多肽的第一多核苷酸(Pn‑POI)、至少一个处于所述第一多核苷酸下游的终止密码子，和处于所述终止密码子下游的编码免疫球蛋白跨膜锚或其功能性变体的第二多核苷酸；b)培养所述真核宿主细胞，以允许表达目的多肽，使得至少部分目的多肽表达为包含所述免疫球蛋白跨膜锚或其功能性变体的融合多肽，其中所述融合多肽展示在所述宿主细胞表面；c)根据展示在细胞表面的融合多肽的存在或量选择至少一个真核宿主细胞。