一种芦笋组织培养的方法

摘要

本发明是一种芦笋组织培养的方法，其特征在于：田间选择健康的芦笋植株，剪下带茎尖的长分枝；消毒处理后接种到芦笋增殖培养基中；先避光培养，然后光照培养、扩繁；将扩繁得到的芦笋单株壮苗转入生根培养基Ⅰ中进行培养，生根后，将根剪去，再转入生根培养基Ⅱ中进行培养；最后将根在含有胶质芽孢杆菌和细黄链霉北京亚种菌溶液中蘸根，移入装有沙壤土的盆中，于自然光照条件下培养20-30天，得成活芦笋苗。本发明采用二步生根法，并通过适当浓度的活性炭的添加来提高芦笋生根率；在移苗过程中，通过用胶质芽孢杆菌和细黄链霉北京亚种菌溶液中蘸根的使用来提高移苗成活率。

主权项

一种芦笋组织培养的方法，其特征在于，其步骤如下：（1）田间选择健康的芦笋植株，用消毒过的剪刀剪下4‑5cm带茎尖的长分枝；取回后在剪口处剪去一段，用体积百分比浓度为75%酒精加质量‑体积百分比浓度为0.5%的十二烷基苯磺酸钠水溶液超声浸泡30秒，再加入质量‑体积百分比浓度为0.1%升汞水溶液摇晃浸泡5分钟，无菌水洗4次，取出放置在消毒好的吸水纸上；（2）在无菌条件下剪下消毒处理后的芦笋茎尖，接种到芦笋增殖培养基中；先避光低温18℃培养3天，然后转移到1500Lx25℃培养5天再将光调到2000Lx其后每20‑30天就可扩繁一次；（3）将扩繁得到的芦笋单株壮苗转入生根培养基Ⅰ中进行培养，培养温度为20‑25℃；（4）芦笋生根后，将根剪去，再转入生根培养基Ⅱ中进行培养，培养温度为20‑25℃；（5）打开培养器皿的封口，再继续培养2‑3天后将芦笋苗从培养器皿中取出，洗净根部附着的培养基，将根在含有胶质芽孢杆菌和细黄链霉北京亚种菌浓度为10×108CFU/ml溶液中蘸根，移入装有沙壤土的盆中，于自然光照条件下，白天22‑25℃、夜间11‑15℃的条件下培养20‑30天，得成活芦笋苗；所述的芦笋增殖培养基是由以下重量配比的原料组成：单位：mg/l，NH4NO3         1600‑1700；       KNO3       1800‑1900；KH2PO3          170‑180；        CaCl2·2H2O    400‑450；MgSO4·7H2O      350‑380；       FeSO4·7H2O     26‑28；Na2‑EDTA         35‑40；        MnSO4·4H2O     20‑25；ZnSO4·7H2O        7‑10；           H3BO3         5‑7；KI            0.5‑1；         Na2MO4·2H2O    0.2‑0.3；CuSO4·5H2O     0.02‑0.03；        CoCl2·6H2O    0.02‑0.03；肌醇         88‑100；            甘氨酸       2‑5；盐酸硫胺素     0.3‑0.5；         盐酸吡哆素     0.3‑0.5；烟酸         0.3‑0.5；            6‑BA        0.1‑0.5；NAA        0.05‑0.2；             蔗糖        30000；琼脂        8000‑12000；  其余为水；   pH为  5.6‑5.8；芦笋生根培养基Ⅰ是由以下重量配比的原料组成：单位：mg/l，NH4NO3         800‑850；      KNO3         900‑950；KH2PO3          85‑90；     CaCl2·2H2O       200‑225；MgSO4·7H2O     175‑190；    FeSO4·7H2O       26‑28；Na2‑EDTA        35‑40；     MnSO4·4H2O      20‑25；ZnSO4·7H2O       7‑10；       H3BO3           5‑7；KI            0.5‑1；    Na2MO4·2H2O      0.2‑0.3；CuSO4·5H2O     0.02‑0.03；   CoCl2·6H2O      0.02‑0.03；肌醇            88‑100；      甘氨酸          2‑5；盐酸硫胺素      0.3‑0.5；    盐酸吡哆素       0.3‑0.5；烟酸            0.3‑0.5；       IBA           0.1‑0.5；NAA            0.1‑1.0；       IAA           0.1‑1.0；6‑糠氨基嘌呤    0.05‑0.2；        蔗糖         30000；琼脂         8000‑12000；   其余为纯净水；   pH  5.6‑5.8；所述的芦笋生根培养基Ⅱ除含有芦笋生根培养基I中所述的重量配比的全部原料外，还含有质量‑体积百分比为0.1‑0.3%的活性炭；其pH为5.6‑5.8。