利用海洋微藻快速评价钻井液急性毒性的方法

摘要

本发明涉及钻井液的生物毒性评价，具体地说是利用海洋微藻快速评价钻井液急性毒性的方法，将平稳生长期的海洋微藻液与钻井液贮备液进行混合培养3～8小时；取样，测定发射荧光光谱，得到678～685nm处的藻叶绿素荧光强度；以未加储备液的微藻荧光强度作为对照，计算微藻的相对死亡率：根据微藻的相对死亡率，利用Curveexpert或Microsoft Excel2003软件绘制微藻死亡率与钻井液浓度关系曲线，根据7～8h EC50值按照国家标准确定钻井液有无毒性。本发明建立的微藻法对水基钻井液的毒性评价结果与卤虫的96h LC50的一致，比常规96h生物毒性实验时间缩短了88h，且能够在现场使用。

主权项

利用海洋微藻快速评价钻井液急性毒性的方法，其特征在于：1)按体积比取1份钻井液加入9份海水，搅拌静置后取上层混悬液做为贮备液；2)选择对钻井液敏感的海洋微藻进行培养至平稳期，得到进入平稳生长期后的海洋微藻藻液；3)取锥形瓶10个或10个以上，将藻液与储备液于锥形瓶中进行混合培养3～8小时；以每个锥形瓶中液体体积为140mL计，藻液体积为100mL，所加入的储备液体积从0至40mL梯度变化，每个浓度设置2个平行样；若混合容器中藻液与储备液的体积不足的，以过滤灭菌后的天然海水补充至140mL；4)从锥形瓶中取样，采用荧光分光光度计测定发射荧光光谱，得到678～685nm处的活体藻叶绿素荧光强度；5)以未加储备液的藻荧光强度作为对照，计算微藻的相对死亡率：微藻的相对死亡率＝(未加钻井液的藻荧光强度‑加钻井液的藻荧光强度)/未加钻井液的藻荧光强度；6)半数有效浓度EC50的计算根据微藻的相对死亡率，利用Curveexpert或Microsoft Excel 2003软件分别绘制微藻死亡率与钻井液浓度关系曲线，得出微藻致死率为50％所对应的钻井液储备液的体积V(mL)，根据EC50＝0.1V×1.02×103/0.14.(单位：mg·L‑1)计算相应时间的EC50值，其中，钻井液储备液的密度近似地取海水密度1.02g·mL‑1。7)根据EC50值按照国家标准确定钻井液有无毒性。