李斯特菌种别及毒力快速检测试剂盒

摘要

李斯特菌种别及单核细胞增多性李斯特菌毒力强弱的快速检测试剂盒，由四个含不同成分的冻存管和100个PCR反应管及检测步骤说明书组成，冻存管分别装有：Taq DNApolymerase，10×buffer，dNTP，引物LM、LN、LS、LVSW、LGU、Ld、1mo0038-1和lmo0038-2，裂解buffer溶液，阳性对照溶液和稀释液。本发明建立的多重PCR方法可同时鉴定李斯特菌各个种并区分单核细胞增多性李斯特菌的毒力强弱，最低检测限可达102CFU/mL，并可同时检测出任何两种不同的李斯特菌，具有很好的准确性、特异性和灵敏性。

主权项

李斯特菌种别及毒力快速检测试剂盒，包括10个含不同成分的冻存管A、B、C、D、E、F、G、H、I和J和100个PCR反应管及检测步骤说明书，其特征在于：冻存管A装有Taq DNA polymerase，10×buffer，dNTP，引物；冻存管B装有裂解buffer溶液1mL；冻存管C～I分别装有0.5mL不同的阳性对照溶液，C管为单核细胞增多性李斯特菌(Listeriamonocytogenes，简称单增李斯特菌)强毒灭活株，D管为单核细胞增多性李斯特菌弱毒灭活株，E管为无害李斯特(Listeria innocua)，F管为伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii)，G管为塞氏李斯特菌(Listeria seeligeri)，H管为威氏李斯特菌(Listeria welshimer)，I管为格氏李斯特菌(Listeria grayi)；冻存管J装有0.58mL稀释液；所述引物为LM、LN、LS、LVSW、LGU、Ld、lmo0038‑1、lmo0038‑2，其序列如下：LM         AAACTGCTAACACAGCTACTLN         TAGCACTCCAGTTGTTAAACLS         CACAAGCGGCTCCTGCTCAACLGU        CTGCGAAACCAGCAGTTTCTLVSW       AACTGAGGTAGCGAGCGAALd         ATACGCGACCGAAGCCAAClmo0038‑1  TTTCAATTATGTACGCCCAGGTGTlmo0038‑2  AATATTTCCGCCGCCAAGTAA