铁皮石斛种苗高效繁殖方法

摘要

本发明涉及一种铁皮石斛种苗的繁殖方法，其特征是将生长健壮的铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)母株人工授粉得到的果实消毒杀菌后切开，用种子萌发培养基培养，使种子萌发成原球茎并进一步形成小苗，再将试管繁殖来的小苗用试管开花培养基培养，开花后选择生长健壮的植株进行试管内人工授粉，果实成熟后切开进行无菌播种，使种子长成小植株，小植株在壮苗培养基上培养，形成成苗，将成苗在自然光下炼苗，进一步栽培成种苗。本发明操作简单，成本低廉，能大大地缩短铁皮石斛果实的成熟期，高效且无病虫害，能周年生产铁皮石斛种子，成苗的移栽成活率可达95％以上，为铁皮石斛种苗的繁殖开辟了一条新的途径。

主权项

1. 一种铁皮石斛种苗繁殖方法，其特征包括以下的步骤：(1)开花时选取生长健壮的铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)母株进行人工授粉，授粉后果实成熟，将果实作为外植体；(2)将外植体依次用酒精浸泡，升汞溶液消毒，无菌水漂洗后切开，将粉末状胚接种到种子萌发培养基，种子萌发形成原球茎，并进一步形成小苗，所述的种子萌发培养基每升含花宝1号1～1.5g，蛋白胨0.5～2g，椰子汁50～100mL，蔗糖15～30g，琼脂6～7g，活性炭0.5～1g，其余为MS培养基中的维生素和肌醇成分；(3)将小苗用试管开花培养基培养，开花后选取生长健壮的植株进行试管内人工授粉，果实成熟后切开进行无菌播种，种子萌发形成原球茎，并进一步形成完整的小植株，所述的试管开花培养基为每升含6-苄基嘌呤0.5～1.0mg，萘乙酸0.1～0.2mg，其余为MS培养基；(4)将小植株移植到壮苗培养基上培养，形成成苗，所述的壮苗培养基每升含花宝1号1～1.5g，花宝2号1～1.5g，蛋白胨0.5～2g，水解酪蛋白0.1～0.3g，香蕉汁50～150g，胡萝卜汁10～30g，苹果汁10～30g，蔗糖10～20g，琼脂6～7g，活性炭1～2g，萘乙酸0.5～1.0mg，其余为MS培养基中的维生素和肌醇成分；(5)将成苗在自然光下炼苗，然后洗净根部的培养基，在用水苔或泥炭和兰石按体积比1∶1混合的基质中栽培，得到种苗；上述步骤(2)～(4)中培养基pH5.2～5.4，培养温度(26±2)℃。