发明名称 |
一种石榴酒酵母的选育方法 |
摘要 |
本发明涉及一种石榴酒酵母的选育方法。现在使用的石榴酒酵母存在着发酵不彻底,石榴酒残糖高、酒度低、挥发酸高、果香淡薄、不宜储存等缺点。本发明根据自然界中野生酵母菌的存在,取石榴园的土壤、石榴树叶、石榴树皮、腐烂石榴、完整石榴的表皮加水离心分离培养;取果酒干酵母,用水活化培养;再将上述两种菌种接种在培养基上培养;经缓冲液冲洗、蜗牛酶处理、电击、紫外光照射诱变,最后经酵母培养基培养制成。本发明的优点是:酵母发酵力强,超过任何其它酵母;对乙醇、单宁、SO<SUB>2</SUB>抵抗力强;能生成更多的乙醇;酿造出的石榴干酒酒香突出,易长期保存;酵母繁殖培养容易。 |
申请公布号 |
CN101302481A |
申请公布日期 |
2008.11.12 |
申请号 |
CN200810017187.0 |
申请日期 |
2008.07.02 |
申请人 |
安徽省成果石榴酒酿造有限公司 |
发明人 |
张家训;李杰 |
分类号 |
C12N1/16(2006.01);C12R1/865(2006.01) |
主分类号 |
C12N1/16(2006.01) |
代理机构 |
安徽省蚌埠博源专利商标事务所 |
代理人 |
杨杰民 |
主权项 |
1.一种石榴酒酵母的选育方法,包括下列步骤:(1)取石榴园的土壤、石榴树叶、石榴树皮、腐烂石榴、完整石榴的表皮各10重量份,放入装有80份水的瓶中,离心机旋转30分钟,120转/分;取0.2毫升接种到用98%的无菌石榴汁和2%的琼脂制作的营养基中;(2)取果酒干酵母1g,用35-40℃水100毫升活化后,取0.1毫升接种于培养基中,28℃培养一天;(3)将上述(1)、(2)两种菌种接在培养基上,30℃培养一天;将培养后的酵母菌斑接种到用石榴汁97%,蛋白胨2%,酵母膏1%杀菌制成的溶液中,35℃,250转/分摇床震荡培养10-12小时;(4)取(3)菌液5毫升,3500转/分离心5分钟,用磷酸缓冲液洗2次,加3毫升预处理剂,29℃培养10分钟后,离心5分钟,3500转/分,弃去上清液;(5)取(3)所得菌液5毫升用蜗牛酶处理30-40分钟;(6)取(4)、(5)所得菌液各0.5毫升混合,用0.4mol/L Cacl2洗涤、离心,涂于培养基上,28℃培养3天;用电击仪电击,电击时间40分钟;(7)取5毫升电击后菌液置于直径9cm的平皿中,用20W紫外光管放于30cm处照射1-2分钟,并不断搅拌,稀释涂布诱变培养基中;(8)取澄清的石榴汁,调整糖度12-14%,PH:5-6,加琼脂2-2.5%,加热至90-95℃溶化,分装于试管中,塞上棉塞,115℃高温杀菌30-40分钟;冷凝后制成酵母培养基;取(7)菌种接种到酵母培养基上,在28-30℃恒温箱中培养3天,取出放在-10℃以下保存;数日后反复培养、提纯,置于-70℃以下贮存。 |
地址 |
233400安徽省怀远县工业园区荆山路01号 |