发明名称 |
一种生物条形码探针的制备方法 |
摘要 |
本发明涉及一种生物条形码探针的制备方法,包括:将纳米金溶液与等体积的吐温20缓冲液混合,离心,浓缩后加入到巯基化探针中,水浴过夜,加高浓度的NaCl溶液,水浴,离心,洗涤,稀释,得生物条形码探针,再将生物条形码探针、磁珠探针和靶序列DNA混合、杂交,磁分离器分离磁珠,去除未杂交的生物条形码探针,洗涤,加洗脱液,处理完成后,用磁分离器去除磁珠,留上清液进行荧光检测。该制备方法制备简单,所制备的生物条形码探针更加稳定,检测时间短,检测特异性大大提高。 |
申请公布号 |
CN101241126A |
申请公布日期 |
2008.08.13 |
申请号 |
CN200810034675.2 |
申请日期 |
2008.03.14 |
申请人 |
东华大学 |
发明人 |
朱旺升;贺明星;范忠鹏;周宇荀;肖君华 |
分类号 |
G01N33/52(2006.01);G01N33/50(2006.01);C12Q1/68(2006.01) |
主分类号 |
G01N33/52(2006.01) |
代理机构 |
上海泰能知识产权代理事务所 |
代理人 |
黄志达;谢文凯 |
主权项 |
1.一种生物条形码探针的制备方法,包括以下步骤:(1)将纳米金溶液与等体积的吐温20缓冲液混合,离心,浓缩;(2)将上述浓缩液加入到巯基化探针中,水浴过夜;(3)加入高浓度的NaCl溶液,水浴;(4)离心,洗涤2-3次沉淀后,稀释,得生物条形码探针;(5)将终浓度10umol/L生物条形码探针、终浓度0.1mg/ml磁珠探针和靶序列终浓度1nmol/L DNA混合、置于55℃水浴杂交20分钟;(6)磁分离器分离磁珠,去除未杂交的生物条形码探针,并洗涤2-3次;(7)加入洗脱液。混合后置于55℃水浴20分钟。处理完成后,用磁分离器去除磁珠,留上清液进行荧光检测。 |
地址 |
201620上海市松江区松江新城区人民北路2999号 |