荷斯坦牛红毛基因快速检测方法及检测试剂盒

摘要

本发明公开了一种荷斯坦牛红毛基因的检测方法，包括牛血样品采集，提取基因组DNA，设计特异性引物，PCR扩增，限制性内切酶消化，凝胶电泳之步骤；其中：所述引物是：1：5’－CATCCCTGACGGGCTCTTTCTC－3’，2：5’－AGCACCTCTTGGAGCGTCTTCC－3’；所述PCR扩增的条件为：95℃预变性5min，然后94℃变性30s，62℃复性30s，72℃延伸30s，35个循环，最后72℃延伸7min；所述限制性内切酶消化用等量的限制性内切酶MspI和限制性内切酶MspAlI。本发明还同时公开了红毛基因快速检测试剂盒，包括PCR试剂盒、RFLP试剂盒两部分。本发明方法简便、快速，而且结果准确、可靠，为优质种公牛纯度鉴别及奶牛育种提供了有力的手段，对优化我国奶牛育种技术体系，保证牛群种质，保持奶业的可持续发展，具有重要意义。

主权项

1.一种中国荷斯坦牛红毛基因的检测方法，包括牛血样品采集，提取基因组DNA，设计特异性引物，PCR扩增，限制性内切酶消化，凝胶电泳之步骤；其特征在于：所述特异性引物序列是：1：5’-CATCCCTGACGGGCTCTTTCTC-3’，2：5’-AGCACCTCTTGGAGCGTCTTCC-3’；所述PCR扩增的反应体系为：15μL，其中含有基因组DNA 100ng，引物0.2mM，dNTPs 0.2mM，MgCl21.5mM，Taq酶1U；所述PCR扩增的条件为：95℃预变性5min，然后94℃变性30s，62℃复性30s，72℃延伸30s，35个循环，最后72℃延伸7min；所述限制性内切酶消化用等量的限制性内切酶MspI和限制性内切酶MspAlI。