酶解制备灵芝多糖的方法

摘要

本发明公开了一种酶解制备灵芝多糖的方法，它包括如下步骤：采用斜面菌种逐级扩培获得灵芝真菌发酵液，调节含有菌丝体的发酵液pH值及温度，借助灵芝菌丝体内存在的自身酶系对发酵液中的灵芝菌丝体进行酶解，再向发酵液中加入纤维素酶、β-葡聚糖酶、果胶酶及中性蛋白酶，进行酶解，再经灭酶、过滤、浓缩、醇沉及分离等步骤得到灵芝多糖，本发明巧妙地利用菌丝体自身酶系和外加的混合酶系在适宜的条件下对灵芝真菌发酵液进行酶解，酶解后灵芝粗多糖产品中灵芝多糖含量为35-60％，灵芝多糖中分子量在6000-50000之间的活性灵芝多糖占70-90％。

主权项

1.一种酶解制备灵芝多糖的方法，其特征在于它包括如下步骤：(1)发酵液的获得：采用灵芝斜面菌种逐级扩培获得灵芝液体深层发酵液，所述灵芝菌种的菌号：CICC 14005；(2)菌丝体自身酶系酶解：调节步骤(1)得到的含有菌丝体的发酵液，使其pH为5～7，在30～70℃，借助灵芝菌丝体内存在的自身酶系对发酵液中的灵芝菌丝体进行酶解，酶解时间30～100分钟，搅拌速度10～100转/分；(3)外加酶酶解：在30～65℃，pH为5～7的条件下，向经步骤(2)得到的发酵液中加入混合酶，所述混合酶与发酵液的重量百分比为0.03～0.05％，所述混合酶按重量百分比包括：纤维素酶5～95％、β-葡聚糖酶5～80％、果胶酶0～70％和中性蛋白酶0～70％，酶解时间0.3～8小时，酶解过程中开启搅拌，搅拌速度10～100转/分；(4)灭酶：酶控反应结束后，将发酵液升温到90～100℃，10～30分钟，进行灭酶；(5)过滤；(6)浓缩：将滤液浓缩至原体积的1/5～1/10；(7)醇沉：向浓缩滤液中加入浓缩液重量3～4倍的70～100％的乙醇进行醇沉；(8)离心分离：沉淀物为灵芝多糖。