α－半乳糖苷酶固体发酵生产方法

摘要

本发明公开了一种α－半乳糖苷酶固体发酵生产方法，包括以下步骤：1)孢子悬液的制备，2)一级种子制备，3)α－半乳糖苷酶的发酵。本发明还公开了同一发明构思下的另一种α－半乳糖苷酶固体发酵生产方法，包括以下步骤：1)孢子悬液的制备，2)一级种子制备，3)二级种子制备，4)α－半乳糖苷酶的发酵。采用本发明的方法生产α－半乳糖苷酶，产酶活力高、工艺简单、易于生产应用。

主权项

1、α-半乳糖苷酶固体发酵生产方法，其特征包括以下步骤：1)、孢子悬液的制备：将保藏号为CGMCC No.1628的臭曲霉接种到斜面培养基上，于28℃恒温培养7天；再用无菌水制成浓度为106～107个/ml的孢子悬液，待用；所述斜面培养基为PDA斜面培养基；2)、一级种子制备：首先将液体种子培养基经121℃、20min灭菌，再冷却；然后按照体积比为5％的接种量将孢子悬液接入上述冷却后的液体种子培养基中，于28℃、转速为200rpm的摇床上培养18h，得液体种子；所述液体种子培养基为PDA液体培养基；3)、α-半乳糖苷酶的发酵：首先将发酵培养基经121℃、20min灭菌，再冷却；然后按照1毫升/10克的接种量将上述液体种子接入冷却后的发酵培养基中，充分搅拌混匀后，于28℃培养4～7天，在培养过程中，于20h时进行混匀振荡发酵培养基的步骤；所述发酵培养基由重量比为2∶3的干基和蒸馏水混和后、调pH至5.5～6.0制成，所述每100g干基由82.137g麸皮、17.843g豆粕、0.01g硫酸锰和0.01g五水硫酸铜组成。