| 发明名称 | 突变型p53基因反义表达载体及其制备方法 | ||
| 摘要 | 本发明公开了一种突变型p53基因反义表达载体及其制备方法，属于基因工程技术。本发明载体上连接有突变的p53外显子8基因序列，并能够转录出与此突变点特异性结合的互补反义RNA，从而阻断突变p53信号的表达；其制备方法是采用免疫组化筛选突变型p53细胞系、PCR－SSCP法及基因测序确定突变的p53外显子和基因序列，把含有突变位点的p53外显子8序列插入pGEM3zf(+/－)质粒载体的多克隆位点处，构建pGEM3zf(+/－)p53exon8’重组载体。这样制备的反义RNA被直接导入研究细胞内，因为是直接导入反义RNA本身，所导入的RNA分子量小，较易进入细胞内，操作简单；由于体外转录系统能合成较多量的产物，可随时重复操作，满足需要的RNA量。 | ||
| 申请公布号 | CN1796562A | 申请公布日期 | 2006.07.05 |
| 申请号 | CN200410094011.7 | 申请日期 | 2004.12.24 |
| 申请人 | 天津医科大学附属肿瘤医院 | 发明人 | 付丽;许少峰;张斌;张媛媛;冯玉海 |
| 分类号 | C12N15/63(2006.01) | 主分类号 | C12N15/63(2006.01) |
| 代理机构 | 天津市宗欣专利商标代理有限公司 | 代理人 | 董光仁 |
| 主权项 | 1.一种突变型p53基因反义表达载体，其特征在于该载体上连接有突变的p53外显子8基因序列：GAATTCGCTT TGAGGTGCGT GTTTGTGCCT GTCCTGGGAA AGACCGGCGCACAGAGGAAG GAGGTCTCCG CAAGAAAGGG GAGCCTCACC ACTGCAGGCATGCAAGGCT；并由此载体能够转录出与此突变点特异性结合的互补反义RNA，从而阻断突变p53信号的表达。 | ||
| 地址 | 300060天津市河西区体院北环湖西路天津医科大学附属肿瘤医院 | ||