检测HBV复制和测试药物敏感性的方法

摘要

可能在有药物产品优选地抗病毒剂存在的情况下，用于测量HBV复制能力的方法，例如存在于生物样品中的HBV。该方法包括：(a)可能地提取包含在生物样品中的核酸；(b)使用至少两对引物进行PCR以扩增HBV的核酸，所选的两对引物能够获得至少两个不同的HBV基因组扩增片段，这两个片段通过组装代表了一个线性连续的、能转录出pgRNA的DNA序列；(c)将由(b)中获得的片段克隆入载体，该片段处于异源启动予控制下，于是就产生一个包含一段线性连续的、在所述启动子控制下能转录出pgRNA的DNA序列的载体；(d)用所述载体转染或转导感受态细胞；(e)在允许从克隆的HBVDNA合成HBV pgRNA的条件下培养转染或转导的细胞；(f)可能地用药物产品特别是抗病毒剂处理培养细胞；并且(g)可能地在药物产品优选地抗病毒剂存在的情况下，根据病毒基因表达和/或病毒复制的情况确定HBV的复制能力。

主权项

1.可能存在药物产品优选地抗病毒剂的情况下，用于测量HBV复制能力的方法，所述HBV例如为存在于生物样品中的HBV，该方法包括：(a)可能地提取包含在生物样品中的核酸；(b)使用至少两对引物进行PCR以扩增HBV核酸，所选的所述两对引物能够获得至少两个不同的HBV基因组扩增片段，这两个片段通过组装代表了一个线性连续的、能转录出pgRNA的DNA序列；(c)将由(b)中获得的片段克隆入载体，该片段处于异源启动子控制下，因此产生包含一段线性连续的、在所述启动子控制下的能转录出pgRNA的DNA序列的载体；(d)用所述载体转染或转导感受态细胞；(e)在允许从克隆的HBV DNA合成HBV pgRNA的条件下培养转染或转导的细胞；(f)可能地用药物产品特别是抗病药剂处理培养细胞；并且(g)可能地在药物产品优选地抗病毒剂存在的情况下，根据病毒基因表达和/或病毒复制的情况确定HBV的复制能力。