发明名称 硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖
摘要 本发明系提供分解硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖之3种酵素,该酵素之制造方法,该酵素之活性化固子,硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖及其分解物以及新颖微生物。
申请公布号 TWI243853 申请公布日期 2005.11.21
申请号 TW090115173 申请日期 2001.06.21
申请人 宝生物股份有限公司 发明人 酒井武;石塚久美子;儿岛薰;岛中一夫;猪饲胜重;加藤郁之进
分类号 C12N9/24;C12N1/20;C12P19/04;C08B37/00 主分类号 C12N9/24
代理机构 代理人 陈长文 台北市松山区敦化北路201号7楼
主权项 1.一种岩藻依聚糖脱乙醯,其特征为具有下列物 理化学性质: (I)作用于硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖及硫酸化葡 糖醛酸化岩藻寡聚糖,而将乙醯基加水分解,使醋 酸游离; (II)最佳pH値为约6~9.1之范围; (III)最佳温度在约23~45℃之范围内。 2.一种-D-葡糖酸,其特征为具有下列物理化 学性质: (I)作用于脱乙醯化硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖及 脱乙醯化硫酸化葡糖醛酸化岩藻寡聚糖,而将-D- 葡糖醛酸基键结加水分解,使D-葡糖醛酸游离; (II)最佳pH値为约5.8~7.8之范围 (III)最佳温度在约14~29℃之范围。 3.一种内--L-岩藻糖,其特征为具有下列物理 化学性质: (I)作用于脱乙醯化硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖及 脱乙醯化硫酸化葡糖醛酸化岩藻寡聚糖,而将-L- 岩藻糖基内向式加水分解,生成在还原性末端具有 L-岩藻糖之寡聚糖; (II)最佳pH値为约4.5~7.5之范围; (III)最佳温度在约23~42℃之范围内。 4.一种制造申请专利范围第1项之岩藻依聚糖脱乙 醯之方法,其特征为培养具有该酵素生产能力之 微生物,再从其培养物取得该酵素。 5.一种制造申请专利范围第2项之-D-葡糖答酸 之方法,其特征为培养具有该酵素生产能力之微生 物,再从其培养物取得该酵素。 6.一种制造申请专利范围第3项之内--L-岩藻糖 之方法,其特征为培养具有该酵素生产能力之微 生物,再从其培养物取得该酵素。 7.一种脱乙醯化硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖之制 造方法,其特征为使申请专利范围第1项之岩藻依 聚糖脱乙醯作用于硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖, 以取得除去至少1分子以上乙醯基之脱乙醯化硫酸 化葡糖醛酸化岩藻聚糖。 8.如申请专利范围第7项之脱乙醯化硫酸化葡糖醛 酸化岩藻聚糖之制造方法,其特征为在氯化钠、钙 盐及/或蛋白质共存下进行。 9.一种脱乙醯化硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖或其 盐,其系藉由申请专利范围第7项之方法得到。 10.一种脱乙醯化脱葡糖醛酸化硫酸化葡糖醛酸化 岩藻聚糖之制造方法,其特征为使申请专利范围第 2项之-D-葡糖酸作用于脱乙醯化硫酸化葡糖 醛酸化岩藻聚糖,以取得除去至少1分子以上葡糖 醛酸残基之脱乙醯化脱葡糖醛酸化硫酸化葡糖醛 酸化岩藻聚糖。 11.如申请专利范围第10项之脱乙醯化脱葡糖醛酸 化硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖之制造方法,其特征 为在氯化钠、钙盐及/或蛋白质共存下进行。 12.一种脱乙醯化脱葡糖醛酸化硫酸化葡糖醛酸化 岩藻聚糖或其盐,其系藉由申请专利范围第10或11 项之方法得到。 13.一种硫酸化葡糖醛酸化岩藻寡聚糖之制造方法, 其特征为使岩藻依聚糖脱乙醯、-D-葡糖酸 及内--L-岩藻糖作用于硫酸化葡糖醛酸化 岩藻聚糖而取得硫酸化葡糖醛酸化岩藻寡聚糖。 14.一种硫酸化葡糖醛酸化岩藻寡聚糖之制造方法, 其特征为使-D-葡糖酸及内--L-岩藻糖 作用于经硷处理之脱乙醯化硫酸化葡糖醛酸化岩 藻聚糖而取得硫酸化葡糖醛酸化岩藻寡聚糖。 15.如申请专利范围第13或14项之硫酸化葡糖醛酸化 岩藻寡聚糖之制造方法,其特征为可在氯化钠、钙 盐及/或蛋白质共存下进行。 16.一种硫酸化葡糖醛酸化岩藻寡聚糖或其盐,其系 藉由申请专利范围第13~15项中任何一项之方法得 到。 17.一种具有从下列通式(I)~(III)选出之化学结构之 糖化合物或其盐: (式中,R为H,SO3H或CH3CO;以及n为0以上之整数)。 18.一种硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖或其盐,其特征 为具有下列物理化学性质: (1)构成糖:含有岩藻糖及葡糖醛酸,其莫耳比为35~44 :10, (2)以下列通式(VIII)表示之硫酸化糖做为构成糖之 必需成分者: (式中,R为H,SO3H或CH3CO)。 19.如申请专利范围第18项之硫酸化葡糖醛酸化岩 藻聚糖,其特征为该n在1~5000之范围内。 图式简单说明: 图1表示藉本发明得到之岩藻依聚糖脱乙醯之pH 与相对活性(%)之关系图。 图2表示藉本发明得到之岩藻依聚糖脱乙醯之温 度(℃)与相对活性(%)之关系图。 图3表示藉本发明得到之-D-葡糖酸之pH与相 对活性(%)之关系图。 图4表示藉本发明得到之-D-葡糖酸之温度( ℃)与相对活性(%)之关系图。 图5表示藉本发明得到之内--L-岩藻糖之pH与 相对活性(%)之关系图。 图6表示藉本发明得到之内--L-岩藻糖之温 度(℃)与相对活性(%)之关系图。 图7表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻寡 聚糖1-(1)之1H-NMR光谱图。 图8表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻寡 聚糖1-(1)之13C-NMR光谱图。 图9表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻寡 聚糖1-(1)之质量分析光谱(质谱)图。 图10表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(2)之质量分析光谱(质谱)图。 图11表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(3)之1H-NMR光谱图。 图12表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(3)之13C-NMR光谱图。 图13表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(3)之质量分析光谱(质谱)图。 图14表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(4)之质量分析光谱(质谱)图。 图15表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(5)之1H-NMR光谱图。 图16表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(5)之13C-NMR光谱图。 图17表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(5)之质量分析光谱(质谱)图。 图18表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(6)之质量分析光谱(质谱)图。 图19表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(7)之1H-NMR光谱图。 图20表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(7)之13C-NMR光谱图。 图21表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(7)之质量分析光谱(质谱)图。 图22表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖1-(8)之质量分析光谱(质谱)图。 图23表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醇酸化岩藻 寡聚糖2-(3)之1H-NMR光谱图。 图24表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖2-(3)之13C-NMR光谱图。 图25表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖2-(3)之质量分析光谱(质谱)图。 图26表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖2-(5)之1H-NMR光谱图。 图27表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖2-(5)之13C-NMR光谱图。 图28表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 聚糖低分子化物,即寡聚糖2-(5),之质量分析光谱( 质谱)图。 图29表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖3-(3)之1H-NMR光谱图。 图30表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖3-(3)之13C-NMR光谱图。 图31表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 聚糖低分子化物,即寡聚糖3-(3),之质量分析光谱( 质谱)图。 图32表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖3-(4)之1H-NMR光谱图。 图33表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖3-(4)之13C-NMR光谱图。 图34表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 聚糖低分子化物,即寡聚糖3-(4),之质量分析光谱( 质谱)图。 图35表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖3-(5)之1H-NMR光谱图。 图36表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 寡聚糖3-(5)之13C-NMR光谱图。 图37表示藉本发明得到之硫酸化葡糖醛酸化岩藻 聚糖低分子化物,即寡聚糖3-(5),之质量分析光谱( 质谱)图。 图38表示本发明硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖之1H- NMR光谱图。 图39表示本发明硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖之13C- NMR光谱图。 图40表示本发明硫酸化葡糖醛酸化岩藻聚糖之红 外线吸收光谱图。
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