| 摘要 |
La presente invención se refiere a procedimientos para inmovilización covalente de biomoléculas a portadores y membranas, en la que se explota la presencia de un His-marcador (marcador de histidina), y en la que residuos de aminoacidos que comprenden dicho His-marcador se implican directamente en la unión covalente. La presente invención proporciona también varias estrategias que aumentan además la probabilidad de inmovilización covalente a través de dichos His-marcadores, tal como mejorar la presentación de dicho His-marcador, elegir las condiciones de reacción apropiadas, tales como el pH, la temperatura, la concentración de reactivo y la cinética, lo que aumenta el contacto entre el His-marcador y los grupos reactivos de dicho portador o membrana, por ejemplo, por el uso de anticuerpos IDA o anti-His o aumentando la hidrofobicidad de la membrana, o protegiendo el resto de la biomolécula de la reacción, por ejemplo, aumentando la hidrofobicidad de dicho portador o membrana, o por la adición de sustrato o competidores, o bloqueando, de otro modo, grupos reactivos, o eligiendo reacciones químicas que tengan una alta selectividad para residuos de histidina. Un portador puede ser también otra biomolécula. Por consiguiente, la presente invención se refiere también a un procedimiento que permite reticulación covalente entre biomoléculas idénticas o diferentes. Cuando tales biomoléculas tienen una tendencia natural a interaccionar unas con otras para formar homo o heterodímeros, se puede explotar una estrategia de aumento de contacto entre los grupos reactivos (dos His-marcadores o un His-marcador y otro grupo reactivo). La presente invención se refiere también a un procedimiento para proporcionar un sistema simultáneo y universal para detección de biomoléculas a través de dicho His-marcador.
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