萝卜溶菌酶及其制备方法

摘要

本发明是以萝卜的根叶为原料,经匀浆浸提过滤,滤液经亲和吸附,装柱洗涤和亲和洗脱、收集酶液、透析、浓缩和冻干成酶制剂。酶活力高达4—7万U/mg。蛋白,酶的活性中心含有Trp、His、Glu和Asp残基,杀菌谱广,不仅对G⁺菌有杀灭作用,对G^－菌同样有杀灭作用。萝卜溶菌酶的成功提取,将为食品业、农作物的病虫害防治上和药医治疗上开拓了新途径。

主权项

1.萝卜溶菌酶，其特征在于该酶的物理特性是灰白色粉末无毒，无味，易溶于水，水溶液晶形为长方形，具有蛋白质性质，达电泳(SDS-聚丙稀酰胺电泳)纯，固体酶制剂的水分(常规法)＜10％，灰分＜7％；其酶学性质：酶的相对分子质量为11.3KD，酶的分子组成是由108个氨基酸的残基以肽键连接的一条肽链组成，为单成分，单体酶；酶蛋白等电点为9.0(pI＝9.0)，酶的酸碱稳定性和作用最适pH分别为pH3.5～7.5和pH5.8～6.6；热稳定性和作用最适温度分别为25～65℃和50～55℃；贮藏稳定性：溶液酶在室温下半衰期200天，固体酶制剂年衰变率为9.8％；Km(溶壁微球菌)40μg/mL；活化能为2.92×104J/mol；酶的活性中心为Trp、His、Glu、Asp残基；酶活性抑制剂：Gly甲脂(1000mmol/L)、组胺(0.2mol/L)、N-乙酰葡萄糖胺(0.9mol/L)、Ca2+(100mmol/L)、Fe2-(0.05mmol/L)；酶活力(效价)4-7万U/mg·蛋白质；