| 摘要 |
<p>L'invention concerne la détection de mésappariements de bases d'ADN par cytométrie de flux. L'invention concerne également l'utilisation de microsphères immobilisées fixatrices de mésappariements et pourvues d'une coque protéinique de manière à fixer de l'ADN coloré par des marqueurs fluorescents et contenant des mésappariements de bases pour permettre une détection par cytométrie de flux. On amène à fluorescence l'ADN génomique concerné au moyen d'une technique particulière. On fond l'ADN fluorescent obtenu et on le laisse s'hybrider à nouveau. Si l'échantillon génomique contient un site polymorphe, l'ADN hybridé une nouvelle fois contiendra des mésappariements de bases. On ajoute aux échantillons d'ADN des microsphères portant une protéine immobilisée fixatrice de mésappariements et on laisse l'ADN contenant des mésappariements de bases se fixer aux protéines fixatrices de mésappariements. On analyse ensuite l'échantillon par cytométrie de flux de manière à détecter l'ADN fluorescent fixé aux microsphères. Le présent procédé d'utilisation de cytométrie de flux pour examiner des mutations comporte plusieurs caractéristiques importantes: il n'est constitué que d'une seule étape, sans essai de lavage, et permet une analyse rapide et sensible. Il permettra l'examen rapide de régions amplifiées afin de détecter la présence de polymorphismes de manière à donner la priorité à certains échantillons pour un séquençage complet ou pour détecter des mutations dans des régions connues du génome.</p> |
