用柞蚕蛹生产外源基因产物的方法

摘要

一种用柞蚕蛹生产外源基因产物的方法，它组建了柞蚕核型多角体病毒表达载体，利用柞蚕蛹为活体宿主，将外源基因克隆到作蚕核型多角体病毒表达载体后，将野生的柞蚕核型多角体病毒ＤＮＡ与重组质粒ＤＮＡ一起转染柞蚕细胞或柞蚕蛹，形成载有外源基因的重组病毒，再将经纯化所得的重组病毒感染柞蚕蛹，即可在柞蚕蛹体内大量表达生产该基因产物。本发明采用柞蚕蛹作为活体宿主，可识别基因的信号序列，表达量高于苜蓿尺蠖１００倍以上。

主权项

1、一种用柞蚕蛹生产外源基因产物的方法，其特征在于：(1)确定柞蚕核型多角体病毒多角体蛋白基因在柞蚕核型多角体病毒基因组中的位置，(2)用步骤(1)所说的柞蚕核型多角体病毒多角体蛋白基因构建系列转移表达载体，(3)得到编码特定蛋白质的外源基因DNA序列，并可操作地与步骤(2)的载体连接获得重组转移表达载体质粒DNA，(4)将所说的重组转移表达载体质粒DNA与柞蚕核型多角体病毒DNA共转染柞蚕细胞或柞蚕蛹，经体内重组而产生带有外源基因DNA序列的重组柞蚕核型多角体病毒，(5)将步骤(4)的重组柞蚕核型多角体病毒感染柞蚕蛹，并在适当条件下使重组病毒在柞蚕蛹中增殖，(6)从步骤(5)中所说的感染的柞蚕蛹中分离纯化所需的外源基因表达产物。