采用金属氧化物磁性微球分离富集磷酸化肽段的方法

摘要

本发明属于无机材料和生化分析技术领域，具体为一种采用具有核壳结构的金属氧化物磁性微球分离富集磷酸化肽段的方法。本发明将上述磁性微球作为微吸附剂直接加入含有痕量磷酸化肽段混合溶液中，在一定条件下进行富集。操作简便，无需离心，避免了离心过程造成的“共沉淀效应”及传统固定金属离子亲和材料的“孔洞效应”，且具有更高的化学惰性和稳定性。本发明方法对于复杂体系中磷酸化肽段具有很好的选择性富集性能，富集效率可提高一个数量级以上；既可将富集的样品洗脱也可不洗脱直接进行基质辅助激光解析电离－飞行时间质谱分析，方法灵活。该方法在蛋白质组学翻译后修饰研究等领域具有良好的实用价值。

主权项

1、一种采用金属氧化物磁性微球分离富集磷酸化肽段的方法，其特征在于直接将金属氧化物磁性微球加入含有磷酸化肽的复杂肽段混合物中，进行痕量磷酸化肽选择性富集，然后采用磁场对富集的磷酸化肽和其他样品分离；最后对富集样品进行洗脱；其中，富集体系pH值为1-6，样品浓度为0.05-5ng/μL，富集时间为30秒-90分钟，富集温度为20-45℃；样品洗脱体系pH值为10-14，洗脱时间为5-60分钟；磁性微球用量是10-1000μg/mL样品；上述金属氧化物微球为核壳结构，其核为Fe3O4，粒径为100-300nm，外壳为金属氧化物层，厚度为30-50nm，这里金属氧化物为TiO2、Al2O3、Ga2O3、ZrO2、In2O3或Ce2O3。