发明名称 |
靶向PLCε基因RNA干扰重组慢病毒载体及其构建方法 |
摘要 |
本发明涉及靶向PLC基因RNA干扰重组慢病毒载体的构建、筛选及其用途。本发明利用RNA干扰技术,针对PLC基因的不同靶序列,构建了四个能在293细胞中表达siRNA的慢病毒真核表达载体,干扰慢病毒是由pLv‑PLCshRNA、pMD2.G和pSPAX2载体共转染293T细胞培养获得。本发明靶向PLC基因RNA干扰重组慢病毒载体能高效特异性的抑制PLC基因表达,可用于制备治肿瘤相关性基因药物。 |
申请公布号 |
CN106399378A |
申请公布日期 |
2017.02.15 |
申请号 |
CN201610979733.3 |
申请日期 |
2016.11.08 |
申请人 |
同济大学苏州研究院 |
发明人 |
房健民;郭佳;蒋明;尹衍新;于丽华;蒋韵 |
分类号 |
C12N15/867(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P35/00(2006.01)I |
主分类号 |
C12N15/867(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种靶向PLCε基因的siRNA重组慢病毒表达载体,是用于肿瘤PLCε基因相关治疗性物质,干扰慢病毒是由pLv‑PLCεshRNA、pMD2.G和pSPAX2载体共转染293T细胞培养获得;其中,所述的pLv‑PLCεshRNA重组载体是在pLv‑shRNA载体的多克隆位点中连接双链DNA片段构建而得,酶切位点是BamHI和EcoRI;所述的双链DNA片段为以下序列中的一种:(1)PLCε‑homo‑U1寡核苷酸序列1:正义链:5’GATCCCCACTTTGTTAGTCAGGAGATCTCGAGATCTCCTGACTAACAAAGTGGTTTTTG3’反义链:5’AATTCAAAAACCACTTTGTTAGTCAGGAGATCTCGAGATCTCCTGACTAACAAAGTGGG3’(2)PLCε‑homo‑U2寡核苷酸序列2:正义链:5’GATCCGCGGATTATTGGAACTCACTACTCGAGTAGTGAGTTCCAATAATCCGCTTTTTG3’反义链:5’AATTCAAAAAGCGGATTATTGGAACTCACTACTCGAGTAGTGAGTTCCAATAATCCGCG3’(3)PLCε‑homo‑U3寡核苷酸序列3:正义链:5’GATCCCCATCATTTATCATGGACATACTCGAGTATGTCCATGATAAATGATGGTTTTTG3’反义链:5’AATTCAAAAACCATCATTTATCATGGACATACTCGAGTATGTCCATGATAAATGATGGG3’(4)PLCε‑homo‑U4寡核苷酸序列4:正义链:5’GATCCGCTGCAATGTTTGAGGCAAATCTCGAGATTTGCCTCAAACATTGCAGCTTTTTG3’反义链:5’AATTCAAAAAGCTGCAATGTTTGAGGCAAATCTCGAGATTTGCCTCAAACATTGCAGCG3’。 |
地址 |
215100 江苏省苏州市吴中区木渎镇金枫南路198号2号楼 |