一种大蒜多糖的提取纯化方法

摘要

本发明公开了一种大蒜多糖的提取纯化方法，包括以下步骤：A、鲜蒜捣碎成大蒜泥；B、向大蒜泥中加入水，然后进行蒸煮，得蒸煮混合液；C、将蒸煮混合液进行充分发酵，发酵完成后进行蒸馏，所得蒸馏液用正己烷进行萃取，得萃取液；D、将萃取液进行加热除蛋白，冷却后进行抽滤，得大蒜多糖粗提取液；E、大蒜多糖粗提液经大孔树脂处理；F、经逆流色谱一步纯化大蒜多糖；G、透析及干燥：将适量体积的上述收集液装入截留分子量为3000的透析袋中，对水透析过夜，将透析过的溶液进行冷冻干燥，得大蒜多糖精品。本发明方法简单，操作方便、效率高、价格低，优化了制备高纯度大蒜多糖的提取工艺，为规模分离纯化大蒜多糖精品提供技术支持。

主权项

一种大蒜多糖的提取纯化方法，其特征在于，包括以下步骤：A、鲜蒜去皮，清洗干净，称重后捣碎成大蒜泥；B、向大蒜泥中加入质量为大蒜泥质量5倍的水，充分进行大蒜泥与水的混合，然后进行蒸煮，直至蒸汽基本无大蒜臭味，得蒸煮混合液；C、将蒸煮混合液进行充分发酵，发酵完成后进行蒸馏，所得蒸馏液用正己烷进行萃取，得萃取液；D、将萃取液进行加热除蛋白，加热温度控制在85℃‑105℃，加热时间为20min‑30min，冷却后进行抽滤，得大蒜多糖粗提取液；E、大蒜多糖粗提液经大孔树脂处理：将浓缩液复溶上DA201极性大孔树脂柱，上样量为柱体积的10%，用水作淋洗液，浓缩流出液；F、经逆流色谱一步纯化大蒜多糖：逆流色谱溶剂系统为MgSO₄:PEG:H₂O，硫酸镁的百分含量为14～18%，PEG（聚乙二醇）分子量为1000～1500，含量为12%～15%；配置好的溶剂放入分液漏斗中，静止过夜，取上相作为固定相，下相作为流动相；逆流色谱仪柱温为25℃，转速为800～1000r/min，转向为正向；用上下相1：1的溶液对浓缩液进行稀释，使多糖含量为1～2mg/mL；上样体积为柱体积的1/10～1/20；定时或定量进行收集，对收集到的各管采用硫酸—苯酚法进行多糖测定；G、透析及干燥：将适量体积的上述收集液装入截留分子量为3000的透析袋中，对水透析过夜，将透析过的溶液进行冷冻干燥，得大蒜多糖精品。