一种从烟草下脚料中提取烟草蛋白的方法

摘要

本发明公开了一种从烟草下脚料中提取烟草蛋白的方法，步骤：称取烟草下脚料，清水；按一定料液比加入缓冲液和提取液，混合后均匀研磨成浆液；将得到的浆液进行浆液压榨、滤膜过滤和离心机离心，加入液氮研磨充分，按一定料液比加入缓冲液，混合后均匀研磨成浆液；取浆液沉淀物，加入洗涤液充分混合、冷置、离心，进行浓缩并干燥后得到烟叶蛋白粉末，加入一定量的丙酮溶液和乙醇溶液，离心、振荡分离后加入酚/SDS溶液，低温冷冻干燥，置于－80℃保存或直接进行蛋白电泳。本发明旨在提供一种植物叶蛋白的提取工艺方法，该工艺方法的最大特点是采用多重制备工艺方法，通过前两次蛋白粗提取，再加上第三次精提取，大大提高了最终产品的纯度，使得纯度达到98％以上。

主权项

一种从烟草下脚料中提取烟草蛋白的方法，其特征在于包括以下具体步骤：1)称取1‑10g烟草下脚料，清水洗去表面杂物，打碎；2)按一定料液比加入0.5‑5mL缓冲液和1.5‑15mL提取液，混合后均匀研磨成浆液；3)将得到的浆液进行浆液压榨、滤膜过滤和离心机离心，去除废渣，得到滤液一和废渣一；4)称取1‑10g废渣一，加入液氮研磨充分，按一定料液比加入5‑50mL缓冲液，混合后均匀研磨成浆液；5)取浆液沉淀物，加入5‑50mL洗涤液充分混合、冷置、离心，得滤液二和废渣二；6)取滤液一和滤液二，对滤液一和滤液二进行浓缩并干燥后得到烟叶蛋白粉末，加入一定量的丙酮溶液和乙醇溶液，离心、振荡分离后加入酚/SDS溶液，重复上述加入丙酮溶液和乙醇溶液洗沉淀；7)取得上述步骤的最后沉淀物，用密封膜封口，密封膜开设有几个小孔，低温冷冻干燥，置于－80℃保存或直接进行蛋白电泳。