一种牛耳枫组织培养方法

摘要

本发明提供了一种牛耳枫组织培养方法，包括以下步骤：消毒处理、初代培养、继代培养、壮苗培养、生根培养和炼苗移栽。本发明的方法用于牛耳枫的组织培养，具有繁殖速度快、繁殖系数大，繁殖后代整齐一致，移栽成活率高的优点。

主权项

一种牛耳枫组织培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)消毒处理：选用成熟、饱满、无病虫害的牛耳枫种子，去皮，清洗，消毒；(2)初代培养：将步骤(1)处理后的外植体切开，剥取完整胚接种到初代培养基中培养，得到无菌小苗，其中，所述初代培养基为添加有0.1～1.0mg/L的6‑BA和0.05～0.1mg/L的NAA的MS培养基；(3)继代培养：无菌小苗切去根部后转接入继代培养基中培养30～35d，其中，所述继代培养基为添加有1.0～2.0mg/L的6‑BA和0.1～0.5mg/L的NAA的WPM培养基；(4)壮苗培养：将分化的小苗转接到壮苗培养基中培养25～35d，其中，所述壮苗培养基为添加有0.1～1.0mg/L的6‑BA、0.01～0.1mg/L的NAA、20～40g/L的蔗糖和5～8g/L卡拉胶的MS培养基；(5)生根培养：将小苗切成单株，接种至生根培养基中诱导根的发育，得到生根苗，其中，所述生根培养基为添加有1.0～5.0mg/L的IBA、0.5～3.0mg/LNAA和20～40g/L蔗糖的1/2MS培养基；(6)炼苗及移栽：生根苗置于室温下经7～10d的自然光炼苗，然后洗净根部培养基，移栽。